肾母细胞瘤细胞生物学特性的实验研究的开题报告 .pdfVIP

穿心莲内酯联合长春新碱调控肾母细胞瘤细胞生物学特性的实

验研究的开题报告

一、研究背景与意义

肾母细胞瘤（Wilms瘤）是一种儿童常见的原发性肿瘤，其发

生率占儿童恶性肿瘤的10%左右。根据病理学特征，肾母细

胞瘤可分为不同的亚型，如常见型、胞外型、上皮样型等。当

前，主要的治疗方法是手术切除和化疗，但对于高危患儿和复

发患者，化疗的效果十分有限。因此，寻找新型的治疗方法对

于肾母细胞瘤的治疗具有重要的意义。

穿心莲内酯是一种来自于四君子汤中的中草药提取物，具有多

种生物活性，包括抗炎、抗氧化、抗肿瘤等作用。穿心莲内酯

能够抑制肿瘤细胞增殖，诱导肿瘤细胞凋亡，并且具有类似化

疗药物的作用。长春新碱是目前常用的化疗药物之一，其抑制

肿瘤细胞增殖的作用已经得到了临床的验证。因此，我们考虑

将穿心莲内酯和长春新碱联合应用，进一步探究二者联合对肾

母细胞瘤细胞生物学特性的影响。

二、研究方法

1、实验细胞种类：人肾母细胞瘤细胞系SK-NEP-1。

2、实验药物：穿心莲内酯、长春新碱。

3、实验组设计：

-对照组：不加入药物的细胞培养基。

-穿心莲内酯组：加入一定剂量（例如10μM）的穿心莲内酯。

-长春新碱组：加入一定剂量（例如5μM）的长春新碱。

-联合组：加入一定剂量的穿心莲内酯和长春新碱。

4、实验指标：

-细胞增殖能力：MTT法检测药物对细胞增殖的影响。

-细胞凋亡率：Annexin-V/PI双染法检测药物对细胞凋亡的影

响。

-细胞周期：流式细胞术检测药物对细胞周期的影响。

-与细胞增殖相关的蛋白表达：Westernblot方法检测药物对

CyclinD1、CDK4等蛋白的影响。

三、研究计划

1、实验时间安排：

-预备工作：确定实验细胞的培养条件，国内外已有文献的查

阅等。（1个月）

-细胞处理及指标检测：细胞处理、各实验条件下的MTT、

Annexin-V/PI、流式细胞术等指标检测。（3个月）

-数据分析及结果展示：实验结果汇总分析，绘制实验结果的

图表。（1个月）

-论文写作与提交：根据实验结果撰写完整实验报告及SCI论

文，准备提交。（2个月）

2、实验预算：

-药品费用：3个月穿心莲内酯和长春新碱的费用约为3000元。

-实验器材费用：荧光显微镜、细胞培养器、流式细胞仪等，

总计约为50,000元。

-实验人员工资：实验员和技术员合计3人，每人工资6000元

/月，共计36,000元。

-其他费用：实验室材料（如培养基、试剂盒等）和场地费用

等，约为8000元。

总预算为约98,000元。

四、研究进展

截至目前，实验组已完成了细胞的培养和实验药物穿心莲内酯

和长春新碱的初步筛选等预备工作。下一步将进入到细胞处理

及指标检测的实验阶段。预计在今年年底前完成实验并提交研

究成果。