第二章蛋白质的组成及物理化学性质.ppt

蛋白质的组成及

物理化学性质一、什么是蛋白质?蛋白质(protein)是由20种氨基酸(aminoacids)通过肽键(peptidebond)相连形成的具有一定空间结构的生物大分子。二、蛋白质的生物学重要性1.蛋白质是生物体重要组成成分分布广：所有器官、组织都含有蛋白质；细胞的各个部分都含有蛋白质。含量高：蛋白质是细胞内最丰富的有机分子，占人体干重的45％，某些组织含量更高，例如脾、肺及横纹肌等高达80％。种类多：1010-1012原因？三蛋白质的分类（3）按功能分类酶蛋白、调节蛋白、转运蛋白、贮存蛋白、收缩蛋白、防御蛋白、毒蛋白、膜蛋白、胶原蛋白、角蛋白、弹性蛋白、丝心蛋白等蛋白质的化学组成蛋白质元素组成的特点：由于体内的含氮物质以蛋白质为主，因此，只要测定生物样品中的含氮量，就可以根据以下公式推算出蛋白质的大致含量：二、蛋白质的基本结构单位——氨基酸蛋白质：由氨基酸组成的不分支的长链生物大分子相对分子量：几千～几十万不等二、蛋白质的基本结构单位——氨基酸已发现的氨基酸超过700余种，但组成生物体蛋白质的氨基酸仅有20种，且均属L-α-氨基酸*。（二）蛋白质氨基酸的分类根据侧链的结构和理化性质可分为四类非极性氨基酸Ala、Val、Leu、Ile、Phe、Pro、Trp、Met；根据侧链结构，Ala侧链的疏水性最小；2.极性中性氨基酸Gly、Ser、Tyr、Cys、Thr、Asn、GlnCys侧链的巯基失去质子的倾向较其它氨基酸大，极性最强Gly侧链介于极性与非极性之间Asp、Glu侧链均含有羧基，可解离带负电荷Lys、Arg、His分别含氨基胍基咪唑基可质子化带正电荷蛋白质的稀有氨基酸蛋白质的稀有氨基酸是基本氨基酸的衍生物，没有相应的三联密码子（三）非蛋白质氨基酸各种组织和细胞中还存在许多其它氨基酸，这些氨基酸不参与蛋白质的组成，称为非蛋白质氨基酸。大多数是常见氨基酸的衍生物已发现的非蛋白质氨基酸已超过700种非蛋白质氨基酸具有广泛的生理功能有些非蛋白质氨基酸在代谢上作为重要的前体或中间产物，如β-丙氨酸是维生素泛酸的前体,瓜氨酸和鸟氨酸是合成精氨酸的前体有些非蛋白质氨基酸在植物抗逆反应中有积极作用，如γ-氨基丁酸有些非蛋白质氨基酸具有毒性，如刀豆氨酸，黎豆氨酸和β-氰丙氨酸大多数非蛋白质氨基酸生物学功能尚不清楚实践意义在已知pH值的电场中进行电泳，由于不同氨基酸迁移的方向和速度不同，可用来分离氨基酸；离子交换层析可用于氨基酸分离、鉴定和定量。等电点的测定用不同pH值的缓冲液对样品进行电泳，样品在电场中不迁移时的电泳缓冲液的pH值即为其pI。等电聚焦电泳：电泳过程中，让凝胶中产生pH梯度，蛋白质样品在相当于该蛋白质等电点的pH位点凝集成一条带不再移动。二、肽（二）几种生物活性肽1.谷胱甘肽(glutathione,GSH)：GSH的巯基具有还原性，可作为体内重要的还原剂保护体内蛋白质和酶分子免遭氧化，使蛋白质和酶处在活性状态。一、蛋白质分子的大小形状蛋白质分子的形状大多数蛋白质分子是近似球形的或椭球形的如：肌红蛋白、血红蛋白、胰岛素、免疫球蛋白、溶菌酶等；少数蛋白质分子是纤维状的或细棒状的，如：血纤维蛋白、胶原蛋白、丝心蛋白、角蛋白等。一、蛋白质分子的大小形状蛋白质分子的大小小者数千，大者数千万，但大多数蛋白质在104～108数量级。测定蛋白质分子量常用的方法——化学组成法、超速离心法、凝胶过滤法、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法蛋白质的等电点（pI）概念：当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。pI是蛋白质的特征性常数。pHpI，带负电荷；pHpI带正电荷。体内多数蛋白pI为5.0左右，在人体体液为pH7.45环境下，多数蛋白带负电荷。蛋白质在等电点时溶解度最小，易聚集形成沉淀。利用蛋白质两性电离的性质，可通过电泳、离子交换层析、等电聚焦、等电沉淀等技术分离蛋白质。1.扩散将一种溶质放在可以使其溶解的溶剂中，则溶质分子便向溶剂的各个方向移动，最终达到了在溶剂中均匀的分散。这种现象，称为分子扩散。——布朗运动的结果扩散的速度取决于颗粒的大小和形状。在超速离心机中去离心，蛋白质颗粒会沉降。这与真溶液的性质不同。2.粘度蛋白质溶液有较大的粘度。其粘度随着蛋白质水合颗粒容积的增大，或分子不对称的增加，而增大。测定蛋白质溶液的