直肠癌切除标本的切缘处胶原组织评价方法 .pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利说明书

(10)申请公布号CN107941760A

(43)申请公布日2018.04.20

(21)申请号CN201711153845.4

(22)申请日2017.11.16

(71)申请人南方医科大学南方医院

地址510000广东省广州市白云区广州大道北1838号

(72)发明人严俊蒋伟许春辉李国新徐硕瑀刘张苑珠陈德鑫李凯严博韬

(74)专利代理机构北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙)

代理人李双艳

(51)Int.CI

权利要求说明书说明书幅图

(54)发明名称

直肠癌切除标本的切缘处胶原组织

评价方法

(57)摘要

本发明提供了一种直肠癌切除标本

的切缘处胶原组织评价方法，涉及病理鉴

别技术领域。本发明通过Masson染色结合

多光子成像分析对直肠癌新辅助治疗后的

直肠癌切除标本的切缘处胶原进行组织评

价，有助于临床工作者了解患者直肠组织

的局部纤维化程度及吻合口的愈合状况，

从而为临床医生在术式选择及后续诊疗中

提供参考，为患者提供更具个性化治疗方

案，最终达到提高患者的生活质量、尽量

避免严重并发症出现的目的。本发明设计

合理，技术成熟，简便易行，具有广阔的

临床应用前景和良好的科研推广价值。

法律状态

法律状态公告日法律状态信息法律状态

权利要求说明书

1.一种直肠癌切除标本的切缘处胶原组织评价方法,其特征在于,所述方法包括以下

步骤:

(a)样本准备:将直肠癌切除标本的切缘处取出后进行常规蜡块制备,每一块组织中连

续切取2~3张组织切片,取一张进行病理学Masson染色,制得Masson染色切片,剩余

组织切片圈注组织粘膜下层后进行冷藏保存,作为待测多光子成像切片;

(b)Masson切片扫描:通过切片扫描仪对Masson染色切片进行整体切片成像,成像完

毕后通过软件标注组织粘膜下层;

(c)标注成像区域:在普通光学显微镜下对Masson染色切片中组织粘膜下层符合直肠

癌切除标本的切缘处胶原区域进行观察,并以标注的组织粘膜下层为基准,与步骤(a)

待进行多光子成像切片进行对比,在待测多光子成像切片上标注对应区域,得到标注

成像区域;

(d)多光子胶原成像:对步骤(c)待测多光子成像切片的标注成像区域的胶原信号进行

二次谐波成像,得到多光子胶原成像图。

2.根据权利要求1所述的直肠癌切除标本的切缘处胶原组织评价方法,其特征在于,

所述步骤(a)中组织切片的厚度为3~8μm。

3.根据权利要求1所述的直肠癌切除标本的切缘处胶原组织评价方法,其特征在于,

所述步骤(a)中冷藏保存为-86°C冰箱保存。

4.根据权利要求1所述的直肠癌切除标本的切缘处胶原组织评价方法,其特征在于,

所述步骤(b)中Masson染色切片的成像倍数为20倍,分辨率为0.50μm/像。

5.根据权利要求1所述的直肠癌切除标本的切缘处胶原组织评价方法,其特征在于,

所述步骤(d)进行二次谐波成像前在多光子成像切片上滴少量无荧光镜油。

6.根据权利要求1所述的直肠癌切除标本的切缘处胶原组织评价方法,其特征在于,

所述步骤(d)二次谐波成像为利用单通道探测器进行成像。

7.根据权利要求6所述的直肠癌切除标本的切缘处胶原组织评价方法,其特征在于,

所述步骤(d)单通道探测器的输出功率为1.5W~1.8W,成像波长为800~820nm,接收波

长为390~410nm。

8.根据权利要求1所述的直肠癌切除标本的切缘处胶原组织评价方法,其特征在于,

所述步骤(d)二次谐波成像的成像倍数为63倍,成像面积为585μm×585μm。

9.根据权利要求1所述的直肠癌切除标本的切缘处胶原组织评价方法,其特征在于,

所述方法具体包括以下步骤:

(a)样本准备:将直肠癌切除标本的切缘处取出后进行常规蜡块制备,