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固定薄血膜时,甲醇不要触碰到厚血膜;载玻片必须清洁无油污;厚血膜在染色之前先用清水滴加在上面进行溶血,以防厚血膜染色后颜色发黑,影响镜检;血片充分干燥后方可染色,防止冲洗染液时厚血膜脱落。未染色血膜的放置时间夏天不宜超过48小时,冬天不宜超过72小时,否则厚血膜会自然固定,影响镜检。血片制作与染色注意事项:血片染色(八)疟原虫镜检(一)厚血膜薄血膜优点血量多,面积小,原虫较为集中。原虫检出率高血量少,面积大,干燥快红细胞完整,原虫形态极少变形。用于观察原虫形态与鉴别虫种。缺点原虫在干燥过程中皱缩,红细胞消失,原虫变形较大,原虫鉴定困难血量比厚血膜少许多,但面积是厚血膜的8-10倍。检查费时,原虫检出率较低用途用于疟疾病人检查虫种、虫期鉴定及初学者教学标本疟原虫厚、薄血膜镜检优缺点疟原虫镜检(二)01显微镜下厚血膜读片顺序02读片顺序:显微镜镜下按由上而下、之字形顺序读片镜检疟原虫结果判断:疟原虫镜检(三)镜检疟原虫结果判断:阴性血片:①检查全部厚血膜视野未查见疟原虫;②最少检查100个厚血膜视野未查见疟原虫(临床病人)。阳性血片:检出各期疟原虫(环状体、裂殖体、配子体)。混合感染:在一个血膜上有2种以上疟原虫感染称为混合感染,较常见的是间日疟原虫与恶性疟原虫混合。镜检判断P.v+P.f混合感染:必须是看到P.v各期原虫和P.f的配子体。疟原虫镜检(四)间日疟和恶性疟的鉴定要点疟原虫形态特征:间日疟(P.vivax)鉴定要点疟原虫镜检(五)红细胞通常涨大薛氏点明显成熟环状体粗大滋养体胞浆有阿米巴样伪足血片中可见各期的原虫形态成熟裂殖体约含12-24个裂殖子疟原虫形态特征:恶性疟(P.falciparum)鉴定要点:疟原虫镜检(六)01红细胞不涨大02小滋养体(环状体)纤细,常有多重感染,环状体内可有2个核03环状体可贴在红细胞边缘04血片中没有其他发育期的大滋养体05配子体呈新月形或腊肠形06成熟裂殖体约含16-32个裂殖子07可出现茂氏点01以下血片采自现症病例02疟原虫镜检(七)镜检示教间日疟环状体2.Intermittentfever;arrivedfromIndia2monthsago.间日疟滋养体3.HistoryofroundtheworldsafariincludingS.America,AsiaandAfrica.Generalmalaise.恶性疟雄配子体4.Unspecifiedoverseastravel.Presentedwithtemperature38.4C三日疟裂殖体5.MalerecentlyreturnedtoAustraliaafterbackpackingthroughAsia.Historyofflulikesymptoms.白细胞6.NewAustralianpreviouslyfromMalaysia.Intermittenttemperaturesandheadaches.白细胞7.Achesandpains,withfever.?GlandularFever,?malaria.间日疟裂殖体恶性疟环状体18.RecenttriptoSouthernIndia-headachesandvaguelyunwell.间日疟裂殖体****************全球基金疟疾项目
镜检技术培训(二)疟原虫检验技术采集血样血片制作血片染色疟原虫镜检采集血样采血部位:耳垂或无名指,01取血方法:通常在耳垂取血,先用75%酒精棉球消毒取血部位,待酒精干后,用左手拇指和食指紧捏耳垂上方或无名指指尖,右手持消毒针迅速刺入皮肤,不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻挤压出血。厚血膜血量约一粒米大小,薄血膜血量为厚血膜的一半或1/3。02血片制作(一)厚血膜:用推片的一角,取血一小滴(约4-4.5微升),置于平置的载玻片上,由里向外一个方向旋转,涂成直径0.8~1厘米大小圆形厚血膜。薄血膜:以推片一端的中部取血一小滴,使血滴与载玻片接触,血液沿推片边缘向两侧展开,将推片与载玻片保持300-450,均匀而迅速适当地用力向前推成舌形薄血膜。1厚血膜2薄血膜3标准的疟疾厚薄血膜片:血片制作(二)把载玻片分成六等份,把厚血膜涂在从右到左的第三格中央,薄血膜涂在第四格前缘至第六格中部,第一、二格备贴标签编号用。厚、
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