破坏性试验(也称为强制降解试验) .pdf

之青柳念文创作

破坏性试验，也称为强制降解试验（stressingtest），

它是在人为设定的特殊条件下，如酸、碱、氧化、高温、

光照等，引起药物的降解，通过对降解产品的测定，验证

检测方法的可行性，分析药物能够的降解途径和降解机制.

每项破坏性试验通常包含以下内容：酸降解一般采取

0.1mol/L－1mol/L盐酸或硫酸；碱降解采取0.1mol/L－

1mol/L的氢氧化钠溶液；氧化降解采取合适的过氧化氢溶

液.以上三种试验，为了加快反应或者提高降解强度，需

要时可以加热或提高浓度；高温试验通常温度高于加速试

验温度的10℃，如50℃、60℃等，对于原料药有时需思

索水溶液或混悬液的降解，或者思索在分歧的pH值条件

下的降解；光照试验条件可采取4500LX.破坏性试验的详

细条件，与详细药物紧密亲密相关，需连系详细药物的特

点，选择合适的条件，使药物有一定量的降解，并对能够

的降解途径和降解机制停止分析，包管实验的意义.

药物经强力破坏发生的降解产品通常采取色谱法测

定，需连系药物和能够降解产品的理化性质，选择分歧的

色谱方法（HPLC、GC、TLC）或检测器，有时可采取分歧

分离机理的色谱系统.下面以HPLC法分析降解产品为例，

说明在停止破坏性试验时的关注点和存在的问题：

1、在选定的破坏条件下，药物应有一定量的降解.

虽然不是每种破坏性条件都使药物发生降解产品，但

一般情况下，很少有一种化合物对每种破坏性试验条件都

稳定，因此，可以通过试验，选择合适的条件，如提高

酸、碱、氧化的浓度或者通过加热等，使药物降解.

对于采取HPLC法测定降解产品时，以主成分计算，

一般降解10%左右.应采取有效的方法对降解产品停止检

测，关注测定的回收量，通常应达到90%左右，证明检测

方法的有效性.

对于破坏性试验时降解量较大的降解产品，建议连系

稳定性研究中加速试验和长期试验的详细杂质数据，参考

ICH对新原料药中杂质的规定（逐日服用最大剂量不超出

2克时，鉴定阈值为0.10%；逐日服用最大剂量超出2克

时，鉴定阈值为0.05%.），需要时停止定性分析，并作为

已知杂质，根据平安性数据，采取已知杂质对照，确定合

理的限度，订入质量尺度.不克不及采取已知杂质停止对

照时，可通过测定降解产品、主成分在测定波长处的吸收

系数，分析二者的差别.若二者吸收系数相差较大时，建

议采取响应因子校正后停止有效节制；如果二者吸收系数

相差较小，建议采取自身对照法或峰面积归一化法停止有

效节制.

药物停止破坏性试验时通常降解为小分子物质，但也

有发生聚合，形成聚合物，如β－内酰胺类抗菌药物，在

高温或高湿时有能够发生聚合物，故应采纳有效方法停止

检测.

在这方面存在的主要问题是：（1）主药完全降解，

无法对降解产品停止有效检测；（2）由于选择的降解条

件强度不敷，使药物未能降解，而误认为药物稳定；

（3）不克不及选择合适测定方法，测定降解产品，使主

成分降解后测定的回收量偏低；（4）未思索破坏性试验

时发生的聚合物；（5）选择的色谱活动相分歧适，在图

谱中有干扰峰.

2、分离度与峰纯度分析

破坏性试验发生的降解产品的个数比较多，采取HPLC

法测定时，需思索主成分与降解产品之间、降解产品相互

之间的分离度，包管降解产品峰与主峰、降解产品峰之间

有杰出的分离度.别的，对于原料药，分离度符合要求也

应思索到主药与起始原料、各合成中间体是否有杰出的分

离度；对于制剂，应注意辅料、辅料降解产品的干扰.色

谱条件的确定通常以最难分离的两个降解产品或降解产品

与主成分之间的分离度符合要求作为依据之一.鉴于降解

产品检测时对分离度要求高，故推荐色谱分析时采取梯度

洗脱，以有效分离降解产品.

与分离度紧密亲密相关的是峰纯度分析.检测峰纯度

通常采取二级管阵列检测器或者液质连用技术分析测定各

色谱峰的纯度，说明在主峰中、各降解产品峰中有没有包

含其它峰.简单地通过观察峰形断定峰的纯度没有说服力.

对于创新药物的破坏性试验来讲，峰纯度分析非常重要，

一是可以懂得降解产品的特性；二是可以有效地检出和节

制杂质.存在的主要问题是：（1）主峰上出现分明的降解

产品峰，测定方法不成行；（2）未对峰纯度停止有效分

析，这是一种罕见现象，在此情况下无法断定主峰中是否

包含着降解产品峰；（3）对于制剂，未思索辅料降解对

测定成果的干扰.

3、检测活