电泳和色谱分离技术(应用).ppt

概述——过程特点色谱的分类3、按分离机制分类①分子排阻色谱或凝胶过滤色谱（sizeexclusionchromatography，SEC或gelfiltrationchromatography，GC）。②离子交换色谱（ionexchangechromatography，IEC）。第21页,共37页，星期六，2024年，5月概述——过程特点色谱的分类3、按分离机制分类③疏水作用色谱（hydrophobicinteractionchromatography，HIC）。④亲和色谱（affinitychromatography，AC）。⑤正相/反相色谱（normal/reversedphasechromatography，N/RPC第22页,共37页，星期六，2024年，5月概述——过程特点色谱的分类3、按使用目的分类①分析用色谱②制备用色谱③流程用色谱第23页,共37页，星期六，2024年，5月概述——过程特点色谱分离过程基础理论保留值、分离度和柱效应（1）保留值保留值通常以保留时间及容量因子来表示。保留值是色谱过程的基本热力学参数之一。它也是色谱定性的基本依据。从进样开始到柱后出现样品的浓度极大值所需的时间为保留时间，与固定相和流动相的性质、柱温、流速、柱体积等因素有关。第24页,共37页，星期六，2024年，5月概述——过程特点色谱分离过程基础理论容量因子指在一定温度和压力下，组分在固定相和流动相之间达到平衡时的质量之比。它与柱尺寸及流速无关，而与溶质在两相间的分配性质、柱温及固定相和流动相之体积比有关。第25页,共37页，星期六，2024年，5月概述——过程特点色谱分离过程基础理论保留值、分离度和柱效应（1）分离度相邻色谱峰峰顶之间的距离除以两色谱峰的平均宽度。当R=1时，两色谱峰的分离程度可达94%；当R=1.5时，两个色谱峰已完全分离。第26页,共37页，星期六，2024年，5月概述——过程特点色谱分离过程基础理论保留值、分离度和柱效应（1）柱效应：用塔板高度和塔板数衡量色谱柱效应。有效塔板数和有效塔板高度第27页,共37页，星期六，2024年，5月概述——过程特点色谱分离过程基础理论色谱理论模型（1）速度方程理论A、B、C分别代表涡流扩散系数、分子扩散项系数和传质阻力项系（2）平衡色谱理论假定在整个过程中，色谱柱中不存在传质阻力，溶质在固定相和流动相中分配平衡能瞬间完成。第28页,共37页，星期六，2024年，5月概述——过程特点色谱分离过程基础理论即在色谱柱内任何时刻和位置，溶质在固定相和流动相中的浓度均符合等温方程由于忽略了非理想流动及各种传质阻力的存在，这个模型是比较粗略的。第29页,共37页，星期六，2024年，5月概述——过程特点色谱分离过程基础理论（3）塔板理论塔板理论将色谱过程比拟为蒸馏过程，不同色谱柱看成是由一系列理论塔板所组成。在一个理论板当量高度HETP的柱高内，溶质在两相间达到一次平衡。由塔板理论可计算理论塔板数及塔板高度.但它是半经验式理论，不能揭示色谱过程本质。第30页,共37页，星期六，2024年，5月概述——过程特点色谱分离过程基础理论（4）轴向扩散理论在色谱过程中，组分在流动相中的轴向扩散是影响色谱区域谱带扩张的主要因素，而有限的传质速率对区域谱带扩张没有影响。轴向扩散理论的基本方程为轴向扩散理论考虑了溶质在流动相和固定相间的传质速率及流动相的流动状态，当传质速率较快而轴向扩散为区域扩张的主要因素时，该理论具有较好的指导意义。第31页,共37页，星期六，2024年，5月概述——过程特点气相色谱及其应用气相色谱仪以惰性气体（载气）作为流动相，以固定液或固体填充剂作为固定相的色谱设备。处理的对象是低分子量或易挥发化合物。不适宜高分子化合物及热敏性化合物的分离和分析。第32页,共37页，星期六，2024年，5月概述——过程特点气相色谱及其应用气相色谱仪气路系统(气源、净化器、气流控制装置）;进样系统(注射器、六通阀、自动进样器）;分离系统(色谱柱、柱箱）;检测系统和数据处理系统。第33页,共37页，星期六，2024年，5月概述——过程特点高效液相色谱及其应用高效