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新生儿溶血病血清学检查标准操作规程

(一)检验目的

检测孕妇产前与其丈夫ABO及Rh血型相容性、孕妇IgG

抗体效价、产后新生儿体内不相容抗体存在情况、新生儿与

产妇之间血型相容性，为新生儿溶血病的预防、诊断及治疗

提供可靠的实验室依据。

(二)检验原理

新生儿溶血病是由母婴血型不合，母亲体内与新生儿红

细胞抗原不配合的IgG性质的血型抗体进入新生儿体内，破

坏新生儿或胎儿红细胞而引起，可发生在胎儿期和新生儿早

期，溶血严重者可出现死胎而流产，存活者则有不同程度的

新生儿黄疸。新生儿溶血病产前诊断方法主要包括检测胎儿

父母的ABO及Rh血型、孕妇不规则抗体筛查、外周血抗A

／抗B或Rh抗体效价来判断新生儿溶血病发生的可能性及

严重程度；新生儿溶血病产后诊断主要包括母子ABO及RhD

血型鉴定试验、新生儿标本三项试验，为临床诊断及进一步

采取治疗手段提供可靠的依据。

(三)适用范围

适用于新生儿溶血病产前、产后血型血清学试验。

(四)设备性能参数

参见血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID

孵育器、强生OrthoBioVue离心机及各全自动血型／配血系

统使用说明书。

(五)器材与试剂

1.器材血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID

孵育器、强生Or-thoBioVue离心机、塑料软试管、塑料硬质

试管(75mmXl2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移

液枪、一次性移液枪头。

2.试剂DiaMedABO／RhD血型卡、OrthoBioVueABO

／RhD血型卡、抗A、抗B血清、Rh分，型血清、生理盐

水、抗球蛋白试剂(市售单克隆)、抗体筛查试剂红细胞、抗

体鉴定试剂红细胞、致敏的阳性对照细胞(自制)。

(六)标本要求

1.夫妇标本EDTA-K或EDTA-K抗凝全血≥3ml(手工

23

操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在1

760g条件下，离心5分钟，离心后无溶血及明显乳糜。

2.患儿标本EDTA-K或EDTA-K抗凝全血≥3ml(手工

23

操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在1

760g条件下，离心5分钟，离心后无明显乳糜。

(七)校准步骤

参照血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID

孵育器、OrthoBioVue离心机及各全自动血型／配血系统使

用说明书中的校准要求执行。

’(八)操作程序

1.产前血清学检查

(1)取夫妇全血标本分别测定ABO血型及RhD血型，具

体操作参照《ABO及RhD血型鉴定试验标准操作规程》。

(2)夫妇ABO血型不配合时，做孕妇血清抗体检查。

①IgG抗A(B)或Rh血型抗体效价测定：参照《ABO及

Rh血型抗体效价测定试验标准操作规程》。

②中和孕妇血清做交叉试验：用DTT或2-Me破坏母血

清中IgM抗体，以此处理后血清与其丈夫细胞做凝聚胺法或

IAT的交叉配血试验，如果出现阳性则可能引起HDN。

2.产后血清学检查

(1)ABO新生儿溶血病血型血清学检查。

①母子标本的ABO血型鉴定：分别取产妇、新生儿的

洗涤红细胞鉴定ABO血型，具体操作参照《ABO及RhD血

型鉴定试验标准操作规程》。

②新生儿标本的三项试验。a.直接抗人球蛋白试验：将

新生儿红细胞用生理盐水充分洗涤3遍，最后1遍将上清控

干，然后加1滴抗人球蛋白试剂，经血清学专用离心机在1

000g条件下，离心15秒，在显微镜下观察结果，有凝集为

阳性，无凝