2024年生理学实验报告.doc

生理學试验汇报

试验一坐骨神經-腓肠肌標本制备

[1]试验目的

1.學习机能學试验基本的组织分离技术；

2.學习和掌握制备蛙类坐骨神經-腓肠肌標本的措施；

3.理解刺激的种类。

[2]试验原理

蛙类的某些基本生命活動和生理功能与恒温動物相似，若将蛙的神經-肌肉標本放在任氏液中，其兴奋性在几种小時内可保持不变。若給神經或肌肉一次合适刺激，可在神經和肌肉上产生一种動作電位，肉眼可看到肌肉收缩和舒张一次，表明神經和肌肉产生了一次兴奋。在机能學试验中常运用蛙的坐骨神經-腓肠肌標本研究神經、肌肉的兴奋、兴奋性，刺激与反应的规律和肌肉收缩的特性等，制备坐骨神經腓肠肌標本是机能學试验的一项基本操作技术。

[3]试验對象

蛙

[4]试验药物

任氏液

[5]仪器与器械

一般剪刀、手术剪、眼科镊（或尖頭無齿镊）、金属探针（解剖针）、玻璃分针、蛙板（或玻璃板）、蛙钉、细线、培养皿、滴管、電子刺激器。

[6]试验措施与环节

①破壞脑、脊髓

取蛙一只，用自来水冲洗洁净（勿用手搓）。左手握住蛙，使其背部向上，用大拇指或食指使頭前俯(以頭颅後缘稍稍拱起為宜)。右手持探针由頭颅後缘的枕骨大孔处垂直刺入椎管（图3-1-1）。然後将探针改向前刺入颅腔内，左右搅動探针2～3次，捣毁脑组织。假如探针在颅腔内，应有碰及颅底骨的感覺。

再将探针退回至枕骨大孔，使针尖转向尾端，捻動探针使其刺入椎管，捣毁脊髓。此時应注意将脊柱保持平直。针進入椎管的感覺是，進针時有一定的阻力，并且伴随進针蛙出現下肢僵直或尿失禁現象。若脑和脊髓破壞完全，蛙下颌呼吸运動消失，四肢完全松软，失去一切反射活動。此時可将探针反向捻動，退出椎管。如蛙仍有反射活動，表达脑和脊髓破壞不彻底，应重新破壞。

图2-1-1

②剪除躯干上部、皮肤及内脏?

用左手捏住蛙的脊柱，右手持粗剪刀在前肢腋窝处连同皮肤、腹肌、脊柱一并剪断（图3-1-2），然後左手握住蛙的後肢，紧靠脊柱两侧将腹壁及内脏剪去（注意避開坐骨神經），并剪去肛门周围的皮肤，留下脊柱和後肢（图2-1-3）。

图2-1-2横断脊柱图2

③剥皮?

一只手捏住脊柱的断端（注意不要捏住脊柱两侧的神經），另一只手捏住其皮肤的边缘，向下剥去所有後肢的皮肤（图2-1-4

图2-1-4

④分离两腿?

用镊子取出標本，左手捏住脊柱断端，使標本背面朝上，右手用粗剪刀剪去突出的骶骨（也可不進行此步）。然後将脊柱腹侧向上，左手的两個手指捏住脊柱断端的横突，另一手指将两後肢担起，形成一种平面。此時用粗剪刀沿正中线将脊柱盆骨分為两半（注意勿伤坐骨神經）。将其中二分之一後肢標本置于盛有任氏液中备用，另二分之一放在蛙板上進行下列操作。

⑤辩认蛙後肢的重要肌肉

蛙类的坐骨神經是由第7、8、9對脊神經從相對应的椎间孔穿出汇合而成，行走于脊柱的两侧，到尾端（肛门处）绕過坐骨联合，抵达後肢背侧，行走于梨状肌下的股二頭肌和半膜肌之间的坐骨神經沟内，抵达膝关节腘窝处有分支進入腓肠肌。

⑥游离坐骨神經和腓肠肌

用蛙钉或左手的两個手指将標本绷直、固定。先在腹腔面用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神經，然後在標本的背侧于股二頭肌与半膜肌的肌肉缝内将坐骨神經与周围的結缔组织分离直到腘窝，但不要伤及神經，其分支待後来用手术剪剪断。同样用玻璃分针将腓肠肌与其下的結缔组织分离并在其跟腱处穿线、結扎。

⑦剪去其他不用的组织，操作应從脊柱向小腿方向進行。

(a)剪去多出的脊柱和肌肉??

将後肢標本腹面向上，将坐骨神經连同2～3节脊椎用粗剪刀從脊柱上剪下来。再将標本背面向上，用镊子轻轻提起脊椎，自上而下剪去支配腓肠肌以外的神經分支，直至腘窝（图3-1-5A），并搭放在腓肠肌上。沿膝关节剪去股骨周围的肌肉，并将股骨刮净，用粗剪刀剪去股骨上端的1/3（保留2/3），制成坐骨神經-小腿的標本。

(b)完毕坐骨神經腓肠肌標本?

将脊椎和坐骨神經從腓肠肌上取下，提起腓肠肌的結扎线剪断跟腱。用粗剪剪去膝关节如下部位，便制成了坐骨神經-腓肠肌標本（图3-1-5B）。

⑧检查標本?

用镊子夹持坐骨神經中枢端，如腓肠肌发生迅速而明显的收缩，阐明標本的兴奋性良好。標本浸入盛有任氏液的培养皿中备用。

图2-1-5

[7]注意事项

①在操作過程中，应給神經和肌肉滴加任氏液，防止表面干燥，以免影响標本的兴奋性。

②標本制成後须放在任氏液中浸泡数分钟，使標本兴奋性稳定，再開始试验效果會很好。

[8]试验图像

[10]成果及分析

①捣毁脑脊髓後的蛙应有何体現？

進针時有一定的阻力，并且伴随進针蛙出現下肢僵直或尿失禁現象。若脑和脊髓破壞完全，蛙下颌呼吸运動消失，四肢完全松软，失去一切反射活動。

②制备好的神經肌肉標