蛋白质的生物合成—蛋白质生物合成的过程(生物化学).pptx

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蛋白质的生物合成生物化学

蛋白质生物合成的过程生物化学

翻译过程从阅读框架的5′-AUG开始,按mRNA模板三联体密码的顺序延长肽链,直至终止密码出现。

一、氨基酸的活化与转运1.氨基酰-tRNA合成氨基酸+tRNA氨基酰-tRNAATPAMP+PPi氨基酰-tRNA合成酶2.氨基酰-tRNA合成酶对氨基酸和tRNA特异性高;具有校正活性。氨基酰-tRNA的表示方法:Ala-tRNAAla、Ser-tRNASer、Met-tRNAMet

真核生物:Met-tRNAiMet原核生物:fMet-tRNAifMet起始肽链合成的氨基酰-tRNA1.第一步反应氨基酸+ATP-E氨基酰-AMP-E+PPi

2.第二步反应氨基酰-AMP-E+tRNA氨基酰-tRNA+AMP+E

二、肽链的合成——核糖体循环1.核糖体大小亚基分离;2.mRNA在小亚基定位结合;3.起始氨基酰-tRNA的结合;4.核糖体大亚基结合。指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核糖体结合而形成翻译起始复合物(translationalinitiationcomplex)。(一)起始

IF-3IF-11.核糖体大小亚基分离

AUG53IF-3IF-12.mRNA在小亚基定位结合

S-D序列在起始密码子的上游约8~13个核苷酸部位有一段富含嘌呤碱基(如-AGGAGG-)的特殊保守序列,称为SD序列,可被核糖体小亚基16SrRNA辨认互补结合。紧接SD序列后的小核苷酸序列,可被核糖体小亚基蛋白rpS-1识别并结合。

IF-3IF-1IF-2GTP3.起始氨基酰tRNA(fMet-tRNAimet)结合到小亚基AUG53

IF-3IF-1IF-2GTPGDPPi4.核糖体大亚基结合,起始复合物形成AUG53

IF-3IF-1AUG53IF-2GTPIF-2-GTPGDPPi翻译起始阶段总结

原核延长因子功能EF-Tu促进氨基酰-tRNA进入A位,结合分解GTPEF-Ts调节亚基EFG有转位酶活性,促进mRNA-肽酰-tRNA由A位前移到P位,促进卸载tRNA释放原核肽链合成的延长因子(二)延长肽链延长包括进位、成肽、转位三步,在核糖体上连续性循环式进行,又称为核糖体循环(ribosomalcycle),每次循环增加一个氨基酸。

1.进位(注册,registration)(1)fMet-tRNAfMet占据P位,A位空缺。(2)第2个密码子相应的氨基酰-tRNA与EF-Tu-GTP结合,其反密码子识别密码子,进入A位。(3)EF-Tu水解GTP,EF-Tu和GDP从核糖体释出,重新形成Tu-Ts二聚体。

TuTsGTPGDPAUG53TuTsGTP

2.成肽是由转肽酶(transpeptidase)催化的肽键形成过程。

3.转位延长因子EF-G有转位酶活性,可结合并水解1分子GTP,促进核蛋白体向mRNA的3侧移动。

fMetAUG53fMetTuGTP

进位转位成肽

1.当mRNA上终止密码出现后,多肽链合成停止,肽链从肽酰-tRNA中释出,mRNA、核糖体等分离的过程。(三)终止2.识别终止密码,RF-1特异识别UAA、UAG;而RF-2可识别UAA、UGA。3.诱导改变转肽酶的酯酶活性为水解活性,使肽链从核糖体上释放。

终止相关的蛋白因子称为释放因子(releasefactor,RF)1、识别终止密码,如RF-1特异识别UAA、UAG;而RF-2可识别UAA、UGA。2、诱导转肽酶改变为酯酶活性,相当于催化肽酰基转移到水分子-OH上,使肽链从核蛋白体上释放。释放因子的功能原核生物释放因子:RF-1,RF-2,RF-3

UAG53RFCOO-

与原核生物相比,真核生物肽链延长过程有不同的反应体系和延长因子。真核细胞核糖体没有E位,转位时卸载的tRNA直接从P位脱落。延长终止与原核生物相比,真核生物翻译终止只有一种释放因子eRF,可识别所有终止密码子。起始真核生物翻译过程1.核糖体大小亚基分离;2.起始氨基酰-tRNA结合;3.mRNA在核糖体小亚基就位;4.核糖体大亚基结合。原核先就位,后结合;真核先结合,后就位

met40S60SMetMet40S60SmRNAeIF-2B、eIF-3、eIF-6①elF-3②GDP+Pi各种elF释放elF-5④ATPADP+PielF4E,elF4G,elF4A,elF4B,PAB③MetMet-tRNAiMet-elF-2-GTP真核生

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