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分子生物学及检验技术复习题(卫检)(1)
41.基因诊断的间接诊断策略中的不确定性的原因是
A遗传标志所带的信息有限B新突变C基因重组
D家系成员不够完整
42.以下哪些是影响融解温度的因素
A化学变性剂B盐溶液的浓度C碱基的组成比例
D溶液的pH值
43、TaqDNA聚合酶的特点是:
A良好的耐热性C.72℃有最高活性D有Mg2+依赖性
44、基因诊断中可以用于基因表达异常的检测方法有
A.RT-PCRBNorthern杂交C基因芯片技术
45.病毒感染的完整性检出策略包括:
A诊断出带菌者或潜在性感染者B病毒感染拷贝数测定
C基因分型及亚型测定
填空题
氨基酰-tRNA合成酶的作用是什么
催化一个特定的氨基酸结合到相应的tRNA分子上
蛋白质合成的基本方式是什么
氨基酸脱水缩合
真核细胞的结构基因含有两种序列是什么:1.外显子
2.内含子
用酚-氯仿抽提DNA时,其中氯仿的作用为:1.减少酚
用量2.使蛋白质变性更彻底3.抑制核酸酶活性
RNA的成熟又称为转录后的加工;方式包括
RNA链的裂解、5’端与3’端的切除和特殊结构的形
成、核苷的修饰和糖苷键的改变、拼接和编辑等
琼脂糖凝胶电泳中指示剂是:溴酚兰
简答题
在基因组DNA的分离和纯化过程中,如何保持基因组DNA
的完整性?
1.尽量简化操作步骤,缩短提取过程以减少变形降解机
会2.减少化学因素对核酸的降解3.减少物理因素对核
酸的裂解4.温度保持在4℃,防止机械剪切力作用
请写出病毒感染的完整性检出策略
1.对病毒的存在与否作出明确判断
2.诊断出携带者
或潜在感染者3.病毒拷贝数测定4.基因分型及亚型
测定5.耐药性检测
解释DNA复制为什么具备高保真性
1.遵守严格的碱基配对规律
2.DNA聚合酶在复制延长
中对碱基有选择作用3DNA聚合酶3’-5’外切活性的校
正作用,复制出错时有及时的纠错功能
分子诊断又称基因诊断,其特点是什么
针对性强,特异性高,灵敏度高,适用性强
在常规PCR定性检测中怎样设置阴性对照和阳性对照?
其意义分别是什么?
对照试验一般都会加阴性对照,阳性对照.监控PCR操作
及扩增,就加水作为阴性对照,阳性质粒或者DNA作为阳
性对照.监控整个核酸提取过程,及PCR过程的话,那就从
核酸提取开始,就将水作为阴性样本做对照,含模板DNA
的菌或者病毒或者组织作为阳性对照.
论述题
1.例举HPV病毒分型的发放,至少三种,并选其中一
种说明原理,及对HPV病毒分型的临床意义
方法:核酸分子杂交技术,PCR技术,基因芯片技术,杂
交捕获技术
杂交捕获原理:将全长8kb的RNA探针与病毒DNA杂交形
成RNA-DNA杂交体,被微孔板包被的特异性抗体捕获,经
雨偶联有碱性磷酸酶的第二抗体结合后,作用于底物发光,根据
光的强弱确定RNA-DNA含量
该方法操作简单,标准化,仪器判读结果客观准确,各实验室重
现性好,适用于大、小和微量HPV-DNA检测,阴性预期值高达99%
HPV分型临床意义:1.宫颈疾病的风险预测,将HPV-DNA检测
作为初筛手段可浓缩高风险人群,根据HPV类型预测受检者发病风险
度,决定其筛查间隔2.疗效评估及术后跟踪3.预防控制及疫苗研发
2.例举HBV病毒分型的发放,至少三种,并选其中一种说明原理,
及对HBV病毒分型的临床意义
方法:RCP-RFLP、PCR-RBD、ELISA、基因分型技术
PCR-RFLP原理:分别针对YMDD野生型和突变型特异性引物进
行PCR扩增,扩增产物用相应的限制性内切酶进行酶切电泳,通过
DNA的酶切图谱鉴别HBV野生株和突变株
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