沈萍微生物学第七章.pptVIP

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;本节重点;第一节概述

一.病毒的发现

二.病毒的特点与定义

特征：1.超显微，非细胞生物

2.DNA或RNA+蛋白质

3.专性细胞内寄生

4.以核酸复制，核蛋白装配增殖

5.离体条件-大分子存在〔保持侵染活力〕

6.对干扰素敏感;定义：

病毒是一类由核酸和蛋白质等少数几种成分组成的超显微“非细胞生物”，其本质是一种只含DNA或RNA的遗传因子，它们能以感染态和非感染态两种状态存在。在宿主体内具生命特征，在离体条件下以大分子状态存在，保持侵染性－－－周德庆

1999年报告了4000余种病毒;真病毒至少含核酸和蛋白质

非细胞生物类病毒侵染性RNA

亚病毒卫星病毒非侵染性RNA

朊病毒蛋白质

二.病毒的宿主范围

原核生物--噬菌体真菌---真菌病毒

植物------植物病毒

动物------动物病毒

三.病毒的分类

dsDNA，ssDNA，dsRNA，+ssRNA,-ssRNA，

逆转录DNA或RNA，裸露的RNA病毒，亚病毒;第二节病毒学研究的根本方法;噬菌斑

噬菌体标本经过适当稀释再接种细菌平板，经过一定时间培养，在细菌菌苔上可形成圆形局部透明区域，为噬菌斑。

直径1-3mm左右------负菌落

噬菌体---原核生物的病毒

1987年电镜观察过2850种噬菌体,其中2700种有尾。包括蝌蚪状〔dsDNA〕、球状〔ssDNA、ssRNA〕、丝状〔ssDNA〕。

温和噬菌体

烈性噬菌体

;空斑和病斑

以单层动物细胞受动物病毒侵染产生的透明斑为空斑。

肿瘤病毒感染单层动物细胞，产生细胞剧增。称为病斑

枯斑

植物病毒接种敏感植物叶片产生的坏死斑为枯斑;2.病毒的纯化

〔1〕按照纯化蛋白质方法---盐析，等电点沉淀有机溶剂沉淀、凝胶层析、离子交换等；

〔2〕根据颗粒的大小，采用超速离心法

10,000~100,000g的离心场中1～2小时沉降，;二.病毒的测定

1.用电镜直接计数

2.病毒的感染性测定－－效价测定

〔1〕蚀〔噬〕斑测定〔双层平板法〕

一个病毒〔噬菌体〕产生一个噬〔蚀〕斑

底层平板〔~2%琼脂培养基7-8ml)37℃计数

双层上层1%培养基3ml10余h噬菌斑

平板法上层平板宿主菌悬液0.2ml混匀

噬菌体试样0.1ml

;〔2〕终点法

半数效应剂量

半数致死剂量LD50

半数感染剂量ID50;三.病毒的鉴定

1.根据病毒感染的宿主范围及感染表现的鉴

定

2.病毒的理化性质鉴定

3.血细胞凝集性质鉴定

4.病毒的血清学鉴定

5.病毒鉴定的分子生物学方法;第三节毒粒性质;2、病毒的形态;3、病毒的根本结构;病毒粒子;

〔1〕螺旋对称壳体

烟草花叶病毒〔TMV〕

病毒外表的衣壳粒有规律地螺旋排列，形成一中空柱，核酸〔ssRNA〕位于衣壳内侧螺旋状沟内。

TMV给烟草带来极大的危害;;〔２〕二十面体对称壳体

腺病毒

腺病毒252个衣壳粒，排成二十面体结构，核酸位于中心

多瘤病毒72个衣壳粒；

脊髓灰质炎病毒32个衣壳粒。;;;〔3〕双对称壳体

T4噬菌体

蝌蚪形：头部、颈部、尾部三局部

头部为20面体结构

尾部为螺旋对称结构;;病毒的壳体结构类型表解;病毒壳体结构类型图示;;;;二.毒粒的化学组成;

结构：逆转病毒5-cap,3-polyA,分段

基因组，黏性末端，循环排列，

末端重复，

含量：1%--50%流感V1%

TMV5%

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