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研究报告
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梅花鹿感染大肠埃希氏菌诊治报告
一、病例概述
1.1病例来源及时间
(1)本病例报告所涉及的梅花鹿感染大肠埃希氏菌病例,源于我国某养殖场。该养殖场位于我国南方地区,主要从事梅花鹿的养殖与繁殖。病例发生时间为2021年10月,当时正值秋季,气候多变,气温逐渐下降,养殖场内梅花鹿的饲养密度较高,饲养环境相对封闭,存在一定的生物安全风险。
(2)感染病例的发现始于10月5日,当时养殖场内一只梅花鹿出现了精神沉郁、食欲下降、腹泻等症状。随后,其他梅花鹿也陆续出现相似症状,养殖场工作人员立即采取了隔离措施,并将病鹿送至当地兽医站进行诊断。经过初步临床检查和实验室检测,确诊为大肠埃希氏菌感染。
(3)据调查,该养殖场此前并未发生过类似疫情。此次疫情发生可能与饲养管理不善、环境卫生恶化、饲料污染等因素有关。在疫情爆发后,养殖场采取了严格的消毒措施,对饲养环境进行了彻底清洁,并对饲料来源进行了全面检查,以防止疫情进一步扩散。同时,养殖场还加强了饲养管理,降低了饲养密度,改善了饲养条件。
1.2病鹿临床表现
(1)病鹿的临床表现主要包括发热、食欲减退和体重下降。病鹿体温持续升高,最高可达41.5℃,伴随着精神沉郁和活动量减少。在发病初期,病鹿食欲明显下降,对饲料兴趣减少,采食量显著降低,体重也随之逐渐减轻。
(2)病鹿的消化系统症状明显,主要表现为腹泻,粪便呈水样,颜色灰白,有时伴有恶臭。部分病鹿还出现粪便中混有血液或黏液的现象。此外,病鹿的口腔黏膜出现苍白,口唇干燥,唾液分泌减少。
(3)病鹿的呼吸系统症状也不容忽视,部分病鹿出现呼吸急促、咳嗽和鼻涕等症状。此外,病鹿的皮肤可能出现红斑、瘙痒和脱毛等现象,部分病鹿的关节部位也可能出现肿胀和疼痛。整体来看,病鹿的临床表现呈现出明显的全身性感染症状。
1.3病史调查
(1)在对病鹿进行病史调查时,了解到该养殖场在疫情爆发前一个月内,曾从外地引进了一批新的梅花鹿。这些新引进的鹿群中,有部分鹿只表现出轻微的消化不良症状,但未引起养殖场方的重视。同时,养殖场在引进新鹿后,并未对全场进行彻底的消毒和隔离措施。
(2)调查发现,病鹿所在的养殖区域卫生条件较差,饲养密度较高,且饲养环境较为封闭。养殖场内粪便堆积,未及时清理,导致养殖场内氨气浓度较高,空气质量恶化。此外,饲养人员对病鹿的护理不当,未能及时隔离病鹿,使得疫情迅速扩散。
(3)在调查中还发现,病鹿的饲料来源存在安全隐患。饲料在运输和储存过程中,可能受到污染,导致饲料中大肠埃希氏菌含量较高。此外,饲养场内水源污染,水质较差,也可能是导致病鹿感染大肠埃希氏菌的一个重要因素。针对以上调查结果,养殖场采取了相应的整改措施,以防止疫情进一步扩散。
二、实验室诊断
2.1样本采集与处理
(1)样本采集过程中,首先对病鹿进行了详细的临床检查,记录了其症状和体征。随后,采集了病鹿的血液、粪便和尿液样本,以及养殖场环境中的土壤、饲料和水源样本。血液样本通过无菌操作采集,确保样本的无菌性。
(2)粪便样本采集时,使用无菌手套和采集器,从病鹿的排泄物中取适量样本,立即放入装有保存液的容器中,以防止样本中的细菌在运输过程中死亡。尿液样本同样采用无菌操作采集,并迅速送至实验室进行检测。
(3)环境样本的采集包括对养殖场内不同区域的土壤、饲料和水源进行随机采样。土壤样本使用土壤采样器采集,饲料样本则从病鹿日常食用的饲料中随机抽取,水源样本则从养殖场内的水井或水龙头处采集。所有采集到的样本均在采集后24小时内送至实验室,并在实验室进行初步的保存和处理。
2.2实验室检测方法
(1)实验室检测首先进行的是病原菌的初步分离,采用麦康凯琼脂培养基和伊红美蓝琼脂培养基,将病鹿的血液、粪便和尿液样本以及环境样本进行分离培养。培养箱温度设定为37℃,观察24至48小时,以检测大肠埃希氏菌的生长情况。
(2)对分离出的疑似大肠埃希氏菌进行进一步的鉴定。通过氧化酶试验、葡萄糖发酵试验、乳糖发酵试验和吲哚试验等生化试验,确认菌株的生化特性。此外,对菌株进行革兰氏染色,观察菌体形态和染色特性。
(3)为了明确菌株的致病性和耐药性,进行了一系列分子生物学检测。采用聚合酶链反应(PCR)技术,针对大肠埃希氏菌的特异性基因进行扩增,并进行电泳分析,以验证菌株的存在。同时,通过最小抑菌浓度(MIC)测试,评估菌株对不同抗生素的敏感性。此外,对菌株进行抗生素耐药基因的检测,了解菌株的耐药谱。
2.3结果分析
(1)实验室检测结果确认,病鹿样本中分离出的大肠埃希氏菌为革兰氏阴性杆菌,呈圆形或杆状,符合大肠埃希氏菌的形态特征。生化试验结果显示,该菌株能够发酵葡萄糖和乳糖,产生吲哚,不产生硫化氢,符合大肠埃希氏菌的生化特性。
(2)分子生
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