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SCGB3A2基因在肾细癌进展中的作用研究

中文摘要

背景肾细胞癌(Renalcellcarcinoma,RCC)是最常见的肾脏肿瘤，起源于近曲小管的

肾透明细胞癌（clearcellrenalcellcarcinoma，ccRCC）是最为普遍的一种RCC亚

型，占所有原发性肾恶性肿瘤的75-80%，在我国其发病率较高。由于肾脏位置相

对隐蔽，早期肿瘤临床症状不明显，发现时往往已经是晚期。肾癌对传统的放化疗

不敏感，肾脏部分切除术和靶向治疗具有显著疗效，但仍有大量转移、复发甚至死

亡案例。

SCGB3A2属于Secretoglobin(SCGB)小分子类细胞因子分泌蛋白超基因家族。

SCGB3A2是一种大小约10kDa的低分子量的小分泌蛋白，能够形成二聚体和四聚

体。大多数SCGB成员高浓度表达于肺、泪腺，唾液腺，前列腺和子宫，但是其生

物学功能在很大程度上依然尚不明确。

前期研究发现SCGB3A2参与肺组织胚胎发育过程，SCGB3A2主要表达于气

道上皮Club细胞，具有抗炎、生长因子、抗纤维化活性，影响多种肺部疾病发生

发展。此外，SCGB3A2还具有生长因子活性和再生肺上皮细胞的潜力。近年来，

有研究发现SCGB3A2表达于小鼠和人肺癌组织中，可作为肺癌的标志物，但是

SCGB3A2SCGB3A2ccRCC

蛋白的生理机能有待阐明。在发生发展中的作用尚未

见报道。本研究对ccRCC患者临床预后与SCGB3A2表达的相关性进行了统计分析，

并通过体内外实验探究了SCGB3A2对肾癌细胞生物学功能的影响。初步探明

SCGB3A2与肾细胞癌进展是否具有相关性，明确SCGB3A2可否作为预测ccRCC

患者疗效及预后的新型分子标志物，为探究ccRCC的分子机制及寻找新的ccRCC

治疗靶点提供科学依据。

方法1)首先利用UALCAN网站分析癌症基因组图谱(TheCancerGenomeAtlas,

TCGA)数据库中523份肿瘤组织样本及72份正常组织样本中SCGB3A2表达及相

关临床病理资料，临床病理资料，分析SCGB3A2表达与肾癌患者临床分期、分级、

生存期等指征的相关性。

2)qRT-PCRWesternblotmRNASCGB3A2

、和免疫组化分别从、蛋白层面验证

在肾透明细胞癌组织和癌旁正常组织中的表达量。

3)构建SCGB3A2siRNA抑制肾癌细胞系，qRT-PCR及Westernblot验证转染

效率。通过Transwell侵袭实验、划痕实验、克隆形成实验、CCK8实验检测干预

I

SCGB3A2表达前后癌细胞生物学功能差异。

4)体内成瘤实验检测SCGB3A2表达对体内肿瘤生长的影响。

结果1)分析TCGA公共数据库中ccRCC患者数据及SCGB3A2mRNA表达，探究

SCGB3A2的表达水平与肾透明细胞癌病理亚型、肿瘤组织学分级、淋巴结转移及

临床分期之间的相关性。SCGB3A2的表达水平在ccB亚型中表达水平显著高于

ccA型。此外，SCGB3A2表达水平与组织学分级呈密切关联，随着分级的提高，

SCGB3A2的表达水平也相应增加，这可能提示SCGB3A2与肿瘤强的侵袭性之间

存在相关性。SCGB3A2表达水平与淋巴结转移密切相关，存在淋巴结转移的病例

SCGB3A2表达水平更高。此外，SCGB3A2表达水平与患者临床期密切相关，分期

越高，SCGB3A2表达水平越高。Kaplan-Meier生存曲线表明，SCGB3A2在肾透明

细胞癌（KIRC）中高表达与不良预后显著相关，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2)通过qRT-PCR和Westernblot检测新鲜肿瘤组织及瘤周组织中SCGB3A2

mRNA和蛋白表达情况，评估肾透明细胞癌组织中SCGB3A2的表达情况。

SCGB3A2在新鲜肾透明细胞癌组织中mRNA和蛋白表达水平均显著上调。

3)免疫组化结果发现SCGB3A2主要表达于肾透明细胞