SLAMF8通过调节巨噬细胞活化对慢性鼻窦炎伴鼻息肉发生发展的影响.pdfVIP

SLAMF8通过调节巨噬细胞活化对慢性鼻窦炎伴鼻息肉发生发展的

影响

摘要

研究目的：

慢性鼻窦炎伴鼻息肉（Chronicrhinosinusitiswithnasalpolyps,CRSwNP）是

一种常见的鼻腔疾病，发病原因尚不明确，可能与遗传、免疫、变态反应、感

染、解剖异常等多种因素有关。SLAMF8是信号淋巴细胞激活分子家族

（signalinglymphocyticactivationmolecule，SLAM）的一个成员，通过调节巨噬

细胞和树突状细胞的吞噬、抗原呈递、细胞因子分泌等功能，参与多种炎性疾

病的发生和发展。本研究旨在探究SLAMF8如何调节巨噬细胞活化，进而对鼻

黏膜上皮细胞的上皮间质转化和紧密连接的影响。我们期望揭示SLAMF8在鼻

黏膜上皮屏障和功能中的作用，为CRSwNP的治疗提供新的靶点和策略。

研究方法：

1．使用R语言对CRSwNP转录组测序数据集进行差异分析、富集分析筛

选出感兴趣的基因SLAMF8。

2．收集40个CRSwNP患者的息肉组织(nasalpolyp，NP)和20个鼻中隔偏

曲患者的中鼻甲黏膜，采用实时定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）和蛋白免疫

印迹（WesternBlotting，WB）实验探究SLAMF8的表达，并将其与临床评分进

行相关性分析。通过免疫荧光对组织中的SLAMF8进行细胞定位。

3．探索SLAMF8对巨噬细胞M1极化的调控作用。在人单核THP-1细胞系

中加入PMA、LPS和IFN-γ刺激，建立巨噬细胞M1极化模型。慢病毒感染敲

除SLAMF8后，qRT-PCR、WB检测巨噬细胞M1标志物CD86、iNOS、CD11b、

NLRP3等的表达。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测巨噬细胞上清液中炎症因

子白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达。

4．探索SLAMF8通过调节巨噬细胞对人鼻上皮细胞系HNEpC的影响。通

过qRT-PCR和WB，比较正常M1巨噬细胞和敲除SLAMF8的巨噬细胞的上清

对HNEpC细胞上皮间质转化（Epithelial-mesenchymaltransition,EMT）的影响。

5.探索SLAMF8通过调节巨噬细胞对原代人鼻上皮细胞（Primaryhuman

nasalepithelialcells,HNECs）的影响。取鼻中隔偏曲患者的中鼻甲黏膜进行体外

原代培养进行气液界面培养分化，通过qRT-PCR和WB，比较正常M1巨噬细

胞和敲除SLAMF8的巨噬细胞的上清对HNECs上皮间质转化、紧密连接（Tight

junctions）的影响。

研究结果：

1.生物信息学结果表明，SLAMF8在CRSwNP中与免疫防御、细菌免疫反应等

进程相关。

2.SLAMF8在CRSwNP患者组织样本中表达上调，与临床评分有一定的相关性。

SLAMF8与巨噬细胞标志物CD68有明显的共定位关系。

3.在炎症刺激下，SLAMF8在M1型巨噬细胞中的表达水平显著升高。SLAMF8

敲除后，观察到巨噬细胞的M1型极化过程受到显著抑制，表面标志物CD86、iNOS、

NLRP3和上清液中分泌的IL-1β、IL-6和TNF-α炎症因子出现明显下降。

4.在HNEpC、HNECs与M1巨噬细胞间接共培养模型中，敲除SLAMF8后，观

察到：上皮标志物E-cadherin表达升高，间质标志物α-SMA、N-cadherin等表达降低；

并且，在HNECs中，紧密连接蛋白Occludin、Claudin-4表达均升高。

研究结论：

与对照相比，SLAMF8在人鼻息肉组织中表达上调，与疾病的进展有一定的相关

性。敲低SLAMF8通过影响巨噬细胞M1极化，降低了巨噬细胞对鼻黏膜上皮屏障功

能的破坏。SLAMF8可能成为治疗CRSwNP的新靶点。