PAPPA2对大鼠肺动脉高压肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及机制研究.pdfVIP

PAPPA2对大鼠肺动脉高压肺动脉平滑肌细胞增殖

的影响及机制研究

摘要

背景与目的：

肺动脉高压（PAH）是一种危及生命的心肺血管疾病，病理表现主要为肺血管

PASMCs

重构、肺血管阻力进行性升高，涉及肺动脉平滑肌细胞（）的过度增殖和

凋亡抵抗。妊娠相关血浆蛋白A2（PAPPA2）可通过IGF相关途径促进软骨细胞和

PAPPA2PAHPASMCs

成纤维细胞的增殖。然而，对中增殖的影响尚不清楚。本研

究旨在探索PAPPA2对大鼠PAH中PASMCs增殖的影响及机制。

方法：

生物信息学分析并检索PAH相关数据获取差异表达基因（DEGs），对DEGs

6-8SD160g—200g

进行系列分析。选取周龄雄性大鼠，体质量采用随机数字表法

将动物分为2组：对照组、PAH组，每组8只。应用野百合碱（MCT）60mg/kg单

PAH4

次腹腔注射建立大鼠模型。周后麻醉状态下，右心导管测量大鼠右心室收缩

压（RVSP）。处死大鼠并取材，计算右心室肥厚指数（RVHI）。苏木素伊红（HE）

MT%

染色观察肺血管形态改变并计算肺小动脉中膜厚度百分比（）、中膜面积百分

比（MA%）。蛋白印迹法（Westernblot）检测肺组织PAPPA2、胰岛素样生长因子

5IGFBP51IGF1R

结合蛋白（）、胰岛素样生长因子受体蛋白（）、增殖细胞核抗

原（PCNA）等相关蛋白表达。免疫荧光染色观察肺小动脉中PAPPA2、IGFBP5、

α-α-SMAPAPPA2IGF

肌动蛋白（）的定位和表达，明确及胰岛素样生长因子（）相

关蛋白在PAH大鼠肺组织中的表达。

3%PASMCsPAHPAPPA2

低氧（氧浓度）诱导模拟体外环境。使用的小干扰

RNA（siRNA）敲低PAPPA2，将细胞分为4组：常氧对照组（常氧+siNC）、常氧

转染组（常氧+siPAPPA2）、低氧对照组（低氧+siNC）、低氧转染组（低氧+siPAPPA2）。

干预24h，5-乙炔基-2-脱氧尿嘧啶核苷（EdU）检测细胞增殖；流式细胞术检测细

WesternblotPAPPA2IGFBP5PCNA

胞周期；划痕实验检测细胞迁移；检测、、以及

通路蛋白PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT的表达，阐明PAPPA2对大鼠PAH中PASMCs

增殖的影响及机制。

结果：

GSE144274951DEGsPAPPA2PAH

从数据集获取个，发现在中显著上调。

体内实验表明，与对照组相比，PAH组大鼠的RVSP、RVHI、