2025年人教版高中生物选择性必修3第3章基因工程第2节基因工程的基本操作程序.pptx

第3章基因工程;第2节基因工程的基本操作程序;

1．阐明基因工程的原理和基本操作程序。

2．针对人类生产或生活中的某一需求，选取适当的基因工程的技术和方法，尝试设计获得某一转基因产品的方案。

3．尝试进行PCR的基本操作并用电泳鉴定PCR的产物。

1．科学思维——结合生产实例，举例说出基因工程的基本操作程序。

2．科学探究——针对人类生产和生活的某一需求，尝试提出初步的基因工程构想，完成初步设计。;指点迷津·拨云见日;知识点一目的基因的筛选与获取;2．获取方法;特别提醒：引物是依据目的基因的已知序列设计而成的，其提供3′端，以便DNA聚合酶催化单个脱氧核苷酸连接。;1．目的基因只能是编码蛋白质的基因。()

2．PCR需要的条件与细胞内DNA复制的条件完全一致。()

3．PCR复性时，温度一般为72℃。();1.PCR过程中为什么需要引物？DNA链复制的方向是怎样的？

提示：DNA聚合酶不能从头合成子链，只能把游离的脱氧核苷酸连接到已经存在的片段上。加入引物，能够使DNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸。DNA链复制的方向总是从子链的5′端向3′端延伸。;2．PCR扩增目的基因时，复性温度的设定是成败的关键。复性温度过高会破坏引物与模板的碱基配对，复性温度过低又会造成引物不能与DNA模板链的特定部位结合。复性温度的设定与引物长度、碱基组成有关，假设引物的长度相同，在GC含量高时，对复性温度的设定有什么要求？说明理由。

提示：在引物的GC含量高时，设定的复性温度要高一些。因为DNA分子中G—C之间有三个氢键，A—T之间有两个氢键。;3．在利用PCR获取和扩增目的基因时，从第几轮循环才会产生完整的目的基因？

提示：第3轮;课内探究·名师点睛;3．PCR反应

(1)条件

①模板：DNA母链(目的基因所在的DNA片段)。

②酶：耐高温的DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)。

③两种引物：分别与两条模板链相结合。

④原料：四种脱氧核苷酸。;(2)过程;过程;(3)结果

上述三步反应完成后，一个DNA分子就变成了两个DNA分子，随着重复次数的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反应过程都是在PCR扩增仪中完成的。;1.下列关于PCR反应体??中所加物质作用的叙述，错误的是()

A．耐高温的DNA聚合酶用于催化DNA子链的合成

B．引物使TaqDNA聚合酶能从引物的5′端延伸DNA链

C．目标DNA母链用作合成DNA复制的模板

D．四种脱氧核苷酸为PCR提供原料

答案：B;解析：通过PCR技术扩增目的基因时，需要用耐高温的DNA聚合酶催化单个脱氧核苷酸聚合形成DNA子链，A正确；在复制时，引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶从引物的3′端开始延伸DNA链，因此DNA合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸，B错误；PCR技术的原理是DNA双链复制，DNA复制时两条链均作为复制的模板，C正确；DNA合成的原料是四种脱氧核苷酸，D正确。;关于引物

①概念：引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸。用于PCR的引物长度一般为20～30个核苷酸。

②作用：使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，见下图：;

;变式训练?下图表示基因工程中获取水稻某目的基因的不同方法。下列相关叙述中正确的是()

A．三种方法都需要酶并均在体外进行

B．①②③碱基对的排列顺序均相同

C．三种方法均属于人工合成法

D．方法a不遵循中心法则

答案：A;解析：这三种方法都是在体外进行的，且都用到酶(方法a需要逆转录酶和DNA聚合酶；方法b需要限制酶；方法c需要DNA聚合酶)，A正确；通过方法a得到的目的基因不含有内含子，通过方法c得到的目的基因的碱基序列可能有多种，因此①②③碱基对的排列顺序不一定相同，B错误；图示a和c属于人工合成法，而b是从供体细胞的DNA中直接分离目的基因的方法，C错误；方法a遵循中心法则，D错误。;知识点二基因表达载体的构建;2．基因表达载体的组成[填图]

3．基因表达载体的构建

首先用一定的_________切割载体，使它出现一个切口，然后用_______限制酶或_________________的限制酶切割目的基因的DNA片段，再利用_______________将目的基因片段拼接到载体的切口处。;1.基因工程操作的核心步骤是目的基因的获取。()

2．启动子位于mRNA的上游。()

3．基因表达载体中的标记基因可用于目的基因的检测与筛选。();分析基因表达载体模式图，回答下面问题：;1．构建基因表达载体时，目的基因应在哪个位置？为什么？

提示：由图可知，目的基因要插入启动子和终止子之间。因为启动子使转录开始，是RNA聚合酶识别和结合的部位；终止子位于