细菌的培养及鉴定.ppt

抗酸染色步骤2、染色包括初染、脱色、复染三步。石炭酸复红维持3-5’3%盐酸酒精30’’~1’美蓝复染1’冲洗干燥油镜观察冲洗冲洗初染脱色复染第31页，共59页，星期日，2025年，2月5日抗酸染色结果抗酸菌呈红色，常堆积成团，排列无序，偶呈分枝状生长。背景及非抗酸性细菌呈兰色。第32页，共59页，星期日，2025年，2月5日抗酸杆菌报告300个视野仅见到1—8条抗酸杆菌填写条数1+：镜检查见3-9条抗酸杆菌/100高倍镜视野2+：镜检查见1—9条抗酸杆菌/10高倍镜视野3+：镜检查见1-9条抗酸杆菌/高倍镜视野4+:镜检查见9条抗酸杆菌/高倍镜视野第33页，共59页，星期日，2025年，2月5日抗酸染色注意事项染色充分脱色时间宁长勿短在涂抹痰标本时严禁对载玻片进行加热第34页，共59页，星期日，2025年，2月5日临床标本培养基选择生殖道标本根据临床医生所写的检验项目接种相应的平板及操作：淋球菌培养接种淋球菌平板;念珠菌培养接种沙保罗培养基；支原体培养则按《支原体培养的操作规程》操作；作普通培养则接种血平板和巧克力平板第35页，共59页，星期日，2025年，2月5日观察细菌在平板上的生长现象血平板：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、湿润度、黏度、溶血性mac平板：大小、形状、颜色、透明度、湿润度、黏度巧克力平板：大小、形状、颜色、透明度、湿润度、黏度第36页，共59页，星期日，2025年，2月5日**革兰阴性菌葡萄球菌第37页，共59页，星期日，2025年，2月5日细菌的初步分类细菌的分离与纯化：自血平板挑出待检菌株的单菌落进行初步的鉴定。如果混有杂菌，应该重新转种分纯。染色与镜检：首先通过革兰氏染色确定基本的分类：（1）G+球菌（2）G-球菌（3）G-杆菌（4）G+杆菌。此外，如果镜下发现革兰氏染色阳性、椭圆形、有芽孢状的较大菌体，可能是真菌。第38页，共59页，星期日，2025年，2月5日金黄色葡萄球菌最重要的致病葡萄球菌血平板上菌落有明显β溶血环，颜色呈金黄色、灰白色或柠檬色分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和甘露醇血浆凝固酶和DNA酶阳性第39页，共59页，星期日，2025年，2月5日第40页，共59页，星期日，2025年，2月5日**葡萄球菌第41页，共59页，星期日，2025年，2月5日第42页，共59页，星期日，2025年，2月5日关于细菌的培养及鉴定第1页，共59页，星期日，2025年，2月5日标本采集原则1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.标本容器须无菌，但不得有消毒剂5.采样后立即送检6.送检标本应注明来源和检验目的第2页，共59页，星期日，2025年，2月5日咳痰方法病人先漱口，清洁口腔，去除表面的菌群病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液无痰可用3％～5％NaCl5ml雾吸约5min导痰以清晨第二口痰为佳标本采集后放置时间不超过2小时第3页，共59页，星期日，2025年，2月5日清洁中段尿液尽量取早晨第一次尿液嘱患者留取标本的前一天晚上少饮水女性病人收集标本前用肥皂水冲洗外阴，再以灭菌清水冲洗尿道口排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿男性病人翻转包皮，清洗尿道口排出几毫升后，不停止尿流,采集中段尿采集标本后立即送检！第4页，共59页，星期日，2025年，2月5日哥伦比亚血平板—营养要求高的细菌巧克力平板—含V、X因子，主要培养嗜血杆菌、脑膜炎球菌和淋球菌用中国蓝/麦康凯平板—G-杆菌用SS平板—沙门氏菌和志贺氏菌用M-H平板—细菌药敏用TCBS平板—弧菌科细菌用沙包氏平板—真菌培养用真菌显色平板—真菌培养用罗氏培养基—分枝杆菌用常用的培养基种类和用途第5页，共59页，星期日，2025年，2月5日临床标本培养基选择血：血培养瓶中断尿：血平板、mac平板脑脊液：血培养瓶、血平板、巧克力平板穿刺液：血培养瓶、血平板、巧克力平板、mac平板胆汁：血平板、巧克力平板、m