四白汤对乙醇诱导的小鼠胃溃疡的防治作用研究.pdfVIP

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四白汤对乙醇诱导的小鼠胃溃疡的防治作用研究

摘要

目的:本研究通过体内实验和体外实验探讨四白汤方(SiBaiDecoction,SBT)对乙

醇(Ethanol,EtOH)诱导的胃溃疡(GastricUlcers,GU)模型小鼠胃黏膜损伤的防治作用

及其分子机制,为其临床应用四白汤治疗胃溃疡提供理论依据。

ShamSH

方法:体外实验将小鼠分为正常对照组(组)、四白汤高剂量组(),

四白汤中剂量组(SM),四白汤低剂量组(SL),法莫替丁组(F),每组20只,

5组小鼠灌服高、中、低剂量四白汤7d后取血分离血清,用于培养细胞建立血清学

研究模型。含药血清的培养基培养人胃黏膜上皮细胞-1(HumanGastricEpithelial

Cells-1,GES-1),细胞进入G0期后加入0.8M乙醇处理4h建立GES-1细胞损伤模

型,采用细胞计数试剂盒-8(CellCountingKit-8,CCK8)法检测乙醇处理后的细胞的活

力、四白汤含药血清培养后细胞活力的影响以及四白汤含药血清培养乙醇损伤后的

细胞的活力。体内实验将60只KM小鼠随机平均分为正常对照组(Sham),四白

汤高剂量+乙醇组(SHE),四白汤中剂量+乙醇组(SME),四白汤低剂量+乙醇组

SLE,+FEE

()法莫替丁乙醇组(),乙醇模型组()。低、中、高剂量实验组每天

分别灌喂四白汤1、2、4g/(kg·d)、法莫替丁10mg/(kg·d),空白组和模型组每天灌

喂等体积0.9%生理盐水。在四白汤干预7d后,在每天四白汤灌胃后1h开始乙醇

56%7ml/kg28d

()的摄入(体重),共。空白组给予等剂量的生理盐水。实验第

42d灌喂结束后将小鼠禁食过夜,第43d称重后按照0.1ml/10mg的标准腹腔注射

10%水合氯醛麻醉实验小鼠,眼球采血收集全血后脱臼断颈处死。观察四白汤方对

小鼠体重和进食量的影响,苏木精伊红染色-(HematoxylinandEosinStaining,HE)检测

各组胃黏膜病理学损伤状况,酶联免疫吸附测定法(Enzyme-LinkedImmunosorbent

Assay,ELISA)法检测血清中炎性标志物炎症相关白细胞介素6(Interleukin6,IL-6)、白

细胞介素1β(Interleukin1Beta,IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TumorNecrosisFactor

Alpha,TNF-α)和白细胞介素10(Interleukin10,IL-10)蛋白的表达水平,生化检测试剂

盒检测胃黏膜丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、活性氧簇(ReactiveOxygen

Species,ROS)、还原型谷胱甘肽过氧化物酶(GlutathionePeroxidase,GSH-Px)和一氧

化氮(NitricOxide,NO)的水平,蛋白质免疫印迹分析(Westernblot)检测

PI3K/AKT/NF-κB通路相关蛋白磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(Phosphorylated

Phosphatidylinositol3-Kinase,P-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(PhosphorylatedProtein

KinaseB,P-AKT)、磷酸化核因子κB抑制因子α(PhosphorylatedNuclearfactorkappa-B

inhibitoralpha,P-IKBα)、核内核因子κBP65(NuclearNuclearFactorKappaB

I

P65,NuclearNF-κBP65)、胞浆核因子κBP65(CytoplasmicNuclearFactorKappaB

P65,CytoplasmNF-κBP65)的表达。

结果:体外实验结果表明乙醇对G

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