第八章钼酶及含钼蛋白固氮酶.pptxVIP

第八章钼酶及含钼蛋白固氮酶;第一节概述;某些含钼的食物;钼在人体内主要分布;一些钼酶的主要成分;所有与钼有关的金属蛋白和金属酶均与氧化还原有关，并参与生物体内的电子传递。

钼酶的组成比较复杂，某些钼酶如固氮酶，黄嘌呤氧化酶，黄嘌呤脱氢酶除了含钼辅酶外，还含有铁硫蛋白或黄素腺嘌呤二核苷酸；另一些钼酶如硝酸盐还原酶，亚硫酸盐氧化酶还含有细胞色素。钼酶中的铁硫蛋白或细胞色素一般充当电子传递媒介，钼活性中心则起着底物结合对底物进行氧化还原等生物催化作用。

钼酶可按其结构和功能的差异分为固氮酶和转氧酶。;RepresentativeMolybdoenzymes;钼辅基：蝶呤辅酶

钼转氧酶分为氧化酶和还原酶。氧化酶为加氧过程；还原酶为失氧过程：

黄嘌呤+O→尿酸

NO3-→O+NO2-（MoIV→MoVI）

SO32-+O→SO42-(MoVI→MoIV)

CO2→O+CO

RCHO+O→RCOOH

钼转氧酶的催化反应与电子传递和钼价态有关。;第二节固氮酶(Nitrogenase)

;工业生产尿素需要高温高压消耗大量的能源，同时污染大气，造成对环境的第一次污染；同时所用化肥仅有30%被农作物利用，大部分进入地下水，对环境造成第二次污染。

固氮微生物在常温常压下利用可再生能源固定空气中的氮素，并直接被植物吸收利用，对环境不产生任何污染。;人类对生物固氮的认识直到20世纪60年代采取得了突破性的进展。

①第一次从细胞水平上观察到在ATP存在下的生物固氮现象。这极大的刺激了固氮酶的生物化学研究和发展；②随后活性酶从生物体内被分离提纯出来，人们利用各种物理方法对固氮酶进行更深入地研究；

③同时，科学家开展了在过渡金属配合物存在下，氮气在溶液中的化学反应，第一个过渡金属双氮配合物被合成出来，且出乎意料的稳定；其后，许多分子氮配合物被相继合成出来，并研究它们在溶液中的还原反应（质子化后可形成肼和氨）。……;固氮酶的分离提纯，在溶液中氮分子的还原以及过渡金属双氮配合物的的制备三方面是相互关联又相互促进的。

在相当长的一段时间里，固氮酶的结构和生物固氮机理一直是科学家们努力探求的目标。

20世纪70年代，成功分离出固氮酶活性中心铁钼辅基，测定了构成固氮酶的铁蛋白和钼铁蛋白的单晶结构，到目前（1993年）为止已经测定了1.16?高分辨率的钼铁固氮酶的晶体结构。在人工固氮酶的研究上取得了重大进展。;固氮酶催化下列反应;第14页，共69页，星期日，2025年，2月5日;生物固氮体系可以分为自生和共生固氮两种类型；

部分固氮微生物只有在有氧的环境中才能有固氮功能；另外一种固氮微生物在缺氧的条件下能够固氮；此外还有一些固氮微生物在需氧和厌氧的条件下均可以自由固氮；

根据固氮酶所含金属的种类，固氮酶主要分为三类：

钼固氮酶，钒固氮酶和铁固氮酶

每类固氮酶均有两种金属蛋白组成，除铁蛋白外，还含有另一种钼铁蛋白（MoFe）或钒铁蛋白（VFe）或铁铁蛋白（FeFe）。;1993年，Rees等得到了分辨率为0.22nm的葡萄球固氮菌和巴氏芽孢菌固氮酶钼铁蛋白的射线结构数据，基本上确定了固氮酶的结构。它是由铁蛋白和钼铁蛋白两种相对独立，相互分离的纯蛋白组成。铁蛋白是一种依赖于供给能量的电子传递体，具有把电子传递给钼铁蛋白的功能；钼铁蛋白是结合底物分子和催化底物还原的部位。;钼固氮酶的结构;铁蛋白是个α2二聚体，含有一个[Fe4S4]2+/1+原子簇桥联两个亚基。MoFe蛋白（Mo-FeProtein,α2β2四聚体）的每一个αβ对含有一对[Fe4S4](即P原子簇)和一个FeMo辅因子(M原子簇)；;钼铁蛋白的晶体结构;钼固氮酶的结构及电子传递;钼固氮酶中铁蛋白的结构;P-cluster：电子从铁蛋白金属簇中心传递到FeMo-辅酶中心的桥梁作用。;由于M-簇是固氮酶固氮成氮的活性中心所在，对它的研究早已引起许多化学家的重视。对比，自1973年以来国内外学者根据结构化学、化学键理论、络合催化原理和化学探针等方法就提出的固氮酶网兜模型，骈联活口双立方烷模型等十几种原子簇模型，都是以Mo为结合底物的核心原子，自然界里为了有效地固氮成氮而演进出的这种独特的活性中心结构，显得比人们的智慧推想更为周到。根据这新的信息，对固氮酶活性中心的结构与功能的研究将会有新的突破。;FeMo-辅酶与蛋白结合部位不多，相对松弛，故易提取；;M簇中相邻的Fe-Fe间的距离为2.58-2.67?；Mo-Fe的距离为2.67-2.73?,这意味着Fe-Fe和Mo-F