单元一器官培养一单元二器官培养二单元三花药培养和花粉培养单.pptVIP

月季茎段侧芽萌发（引自谭文澄、戴策刚，1991）月季茎段侧芽萌发在茎段培养中，促进腋芽增殖用6-BA是最为有效的。生长素虽不能促进腋芽增殖，但可改善苗的生长。GA对芽的伸长有促进作用。继代扩繁是茎段培养的主要一步。这可由二种途径解决：一是促进腋芽的快速生长；二是诱导形成大量不定芽。二、培养方法和程序茎段快繁方式模式图第一种途径的好处是不会产生变异，能保持品种优良特性，且方法简便，可在各种植物上使用。每年从一个芽可扩繁增殖10万株以上。茎段快繁方式模式图第二种途径（诱导形成大量不定芽）有时会产生变异。继代增殖过程所用培养基和生长调节剂与初代培养相同，有时会稍低。二、培养方法和程序生根培养主要是降低或除去细胞分裂素而加入生长素。由于在苗增殖时施用了较高浓度的细胞分裂素，其苗中保持着一定的量，因此在生根培养中不需要加细胞分裂素。生长素的浓度，NAA一般为0.01～1.0mg/L，IBA和IAA可稍高。生根培养时最好在培养基中加0.3%活性炭，以促进生根。二、培养方法和程序二、培养方法和程序2.移植这是组织培养的关键一环。试管苗是在恒温、湿度饱和、营养丰富、激素适当和无菌条件下生长的。植物的组织发育程度不高，植株幼嫩，表皮角质层变薄，抵抗力减弱。移植是一个由异养转变为自养的过程。因此，在驯化时要进行炼苗。然后洗净琼脂，小心移栽，初期湿度要大，基质通气良好，保湿保温，更要精心管理等。二、培养方法和程序二、培养方法和程序视频4-1-12驯化移栽移栽成活大田定植二、培养方法和程序为什么说植物器官培养是组织培养的一个最重要的方面？器官培养包括哪些类型？植物的离体根培养有何意义？普通茎尖培养时，怎样取材和处理外植体？茎尖培养过程中会出现什么现象？怎样解决？茎段培养与茎尖培养有什么主要区别？12345思考练习茎尖生长出现症状及原因茎尖在培养过程中出现生长太慢的症状及可能原因：症状：接种后茎尖不增大，只是茎尖逐渐变绿，出现绿色小点，细胞逐渐老化而进入休眠状态，或者逐渐变褐死亡。原因：生长素浓度太低，或是温度过低或过高；茎尖生长出现症状及原因茎尖在培养过程中出现生长太快的症状及可能原因：症状：接种后茎尖迅速增大，在茎尖基部产生愈伤组织，并迅速增殖，而茎尖不伸长，久之茎尖也形成愈伤组织，从而丧失发育成苗的能力。原因：一是生长素浓度过高，引起细胞疯狂分裂而导致愈伤组织的形成。二是光照太弱或温度太高。茎尖在培养过程中生长正常症状：原因：接种后茎尖基部稍增大并形成少量愈伤组织，茎尖颜色逐渐变绿，并逐渐伸长，叶原基发育成可见的小叶，进而形成小苗。茎尖生长出现症状及原因茎尖取材示意图视频4-1-2外植体采集与处理视频外植体采集与处理视频

茎尖的解剖构造（引自刘进平，2005）茎尖的解剖构造一、普通茎尖培养2.灭菌将采到的茎尖切成0.5～1.0cm长，并将大叶除去，休眠芽预先剥除鳞片。将茎尖置于流水冲洗2～4小时(视干净程度），再在70%的酒精中处理10-30秒，然后在稀释5～10倍的次氯酸钠（商品次氯酸钠为10%）中浸10～15分钟，最后用无菌水冲洗3～4次，或者用0.1～0.2%的氯化汞灭菌5～10分钟，无菌水冲洗5次以上。茎尖灭菌视频4-1-3外植体灭菌外植体灭菌视频一、普通茎尖培养3.接种为了减少污染，可在接种前再剥掉一些叶片，使茎尖为0.5cm左右大小。有些植物的茎尖由于多酚氧化酶的氧化作用而发生褐化，使培养基变褐，影响材料的成活。所以在接种时，不能用生锈的解剖刀，动作要敏捷，随切随接，减少伤口在空气中暴露的时间，也可配制1～5%Vc液，将切下的茎尖材料浸入处理一下。视频4-1-4接种接种视频一、普通茎尖培养4.培养（1）培养基多数茎尖培养采用MS作为基本培养基或改良MS培养基。培养基中生长素是必须的，如2,4-D，IAA，NAA等，一般用0.1mg/L左右，高于此浓度，往往产生畸变芽或形成愈伤组织。茎尖在培养过程中会出现生长太慢、生长太快和生长正常等三种类型。桑树茎尖萌发桑树茎尖萌发

杨树顶芽萌发成丛生芽杨树顶芽萌发成丛生芽

一、普通茎尖培养4.培养（2）初代培养茎尖的初代培养主要是通过适宜的培养条件刺激顶芽和腋芽的生长。外植体启动生长的关键主要是培养基的激素配比与浓度，一般应使用较高浓度的细胞分裂素和较低浓度的生长素，解除顶端优势的抑制作用，生长素浓度过高容易产生愈伤组