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人肝癌细胞系7721中CD90+细胞的分选鉴定及特性研究

一、引言

1.1研究背景与意义

肝癌，作为全球范围内常见且恶性程度极高的肿瘤，严重威胁着人类的生命健康。据统计，2018年中国新发肝癌病例高达39万多人，位居新发恶性肿瘤的第三位，同年因肝癌死亡的人数约36万，同样位列恶性肿瘤死亡人数的第三位，且全世界47%的肝癌发生在中国。肝癌的高发病率和死亡率与中国乙型肝炎的大面积流行密切相关，尽管目前乙肝阳性率有所下降，约为7%-8%，但庞大的人口基数使得中国肝癌患者人数在全球居于首位。现阶段，肝癌的治疗手段虽呈多样化发展，涵盖外科切除、局部消融、介入治疗、放射治疗、化疗、生物治疗以及中医中药治疗等。然而，由于肝癌自身复杂的生物学特性，如高侵袭性、易转移和复发等，加上治疗方法的局限性以及治疗观念的差异，肝癌的总体疗效仍不尽人意，患者的5年生存率较低。

肿瘤干细胞理论的提出，为肿瘤的研究和治疗开辟了全新的视角。该理论认为，肿瘤组织中存在一小部分具有干细胞特性的细胞，即肿瘤干细胞（TSC）。它们具备自我更新、无限增殖和多向分化的能力，是肿瘤发生、发展、转移和复发的根源。与普通肿瘤细胞相比，肿瘤干细胞对常规的放化疗具有更强的耐受性，这也解释了为何肿瘤在经过常规治疗后容易复发。因此，深入研究肿瘤干细胞，探寻针对它们的有效治疗策略，成为攻克肿瘤难题的关键所在。

在肝癌研究领域，众多研究表明，CD90作为一种重要的细胞表面标志物，与肝癌干细胞密切相关。CD90，又称Thy-1，是一种糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚定的细胞表面蛋白。在正常组织中，CD90在多种细胞上表达，如造血干细胞、间充质干细胞等，参与细胞间的相互作用、信号传导和细胞黏附等过程。在肝癌组织中，研究发现CD90在部分肝癌细胞上高表达，且这些CD90+细胞展现出明显的干细胞特性。相关研究显示，CD90+肝癌细胞在体外具有更强的克隆形成能力和自我更新能力，能够形成肿瘤球，且在体内具有更高的致瘤性。将CD90+肝癌细胞接种到免疫缺陷小鼠体内，能够引发肿瘤的形成，而CD90-肝癌细胞则难以致瘤。此外，CD90的表达与肝癌的病理分级相关，在高分级的肝癌组织中，CD90的表达水平往往更高。这表明CD90+细胞在肝癌的发生、发展过程中可能发挥着关键作用，极有可能是肝癌干细胞的重要组成部分。

对人肝癌细胞系7721中CD90+细胞进行分选和深入研究，具有至关重要的意义。从基础研究角度来看，有助于更深入地了解肝癌干细胞的生物学特性，包括其自我更新、增殖、分化的调控机制，以及与肿瘤微环境之间的相互作用。这将进一步丰富我们对肝癌发生、发展分子机制的认识，为肝癌的基础研究提供新的理论依据。从临床应用角度出发，有望为肝癌的治疗开辟新的途径。通过精准靶向CD90+肝癌干细胞，能够更有效地根除肿瘤细胞，降低肿瘤的复发和转移风险，提高肝癌患者的生存率和生活质量。此外，CD90+细胞还可能作为潜在的生物标志物，用于肝癌的早期诊断、病情监测和预后评估。因此，本研究对于推动肝癌的基础研究和临床治疗发展具有重要的科学价值和现实意义。

1.2国内外研究现状

在肝癌研究领域，人肝癌细胞系7721作为常用的细胞模型，一直是众多科研工作者关注的焦点。国内外学者围绕其开展了大量深入且全面的研究，涵盖了细胞的生物学特性、分子机制以及相关治疗靶点探索等多个关键方向。

在生物学特性研究方面，国内学者对7721细胞的生长特性进行了细致观察，明确了其在不同培养条件下的生长曲线和倍增时间。研究发现，在常规的细胞培养基中，7721细胞呈贴壁生长，具有典型的上皮样形态。随着培养时间的延长，细胞逐渐铺满培养皿底部，当细胞密度达到一定程度时，会出现接触抑制现象。同时，对其细胞周期的研究表明，7721细胞在G1期、S期和G2/M期的分布比例呈现出特定的规律，这为后续研究细胞增殖和分化的调控机制奠定了基础。国外学者则从细胞的代谢角度展开研究，揭示了7721细胞独特的代谢模式，如对葡萄糖、氨基酸等营养物质的摄取和利用特点。研究发现，7721细胞在代谢过程中，对葡萄糖的摄取速率明显高于正常肝细胞，且其糖酵解途径更为活跃。这一发现不仅为理解肝癌细胞的能量代谢提供了新的视角，也为开发针对肝癌细胞代谢的治疗策略提供了理论依据。

在分子机制研究领域，国内科研团队聚焦于7721细胞中关键基因的表达和调控机制。通过高通量测序技术，筛选出了一系列在7721细胞中差异表达的基因。对这些基因的功能研究发现，部分基因参与了细胞增殖、凋亡、侵袭和转移等重要生物学过程的调控。例如，某基因的高表达与77