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PCR实验室知识及新冠检测生物安全培训考试(试题及答案)

一、单项选择题（每题2分，共30分）

1.PCR实验室核心工作区域中，需设置为正压环境的是：

A.试剂准备区

B.样本处理区

C.扩增区

D.产物分析区

答案：A

解析：PCR实验室为防止交叉污染，试剂准备区需保持正压（相对于相邻区域），避免外界空气进入污染试剂；样本处理区、扩增区、产物分析区通常为负压或与外界压差更小。

2.新冠病毒核酸检测中，样本处理时使用的生物安全柜应符合：

A.Ⅰ级生物安全柜

B.Ⅱ级A1型生物安全柜

C.Ⅱ级B2型生物安全柜

D.Ⅲ级生物安全柜

答案：C

解析：新冠病毒属于乙类传染病病原（按甲类管理），样本处理涉及可能产生气溶胶的操作（如加样、离心），需使用Ⅱ级B2型（全排型）生物安全柜，确保操作区空气经高效过滤器（HEPA）过滤后直接外排，避免污染实验室环境。

3.新冠检测实验室工作人员穿戴防护装备的正确顺序是：

A.戴口罩→穿防护服→戴护目镜→戴手套→穿鞋套

B.穿鞋套→穿防护服→戴口罩→戴护目镜→戴手套

C.戴口罩→戴护目镜→穿防护服→戴手套→穿鞋套

D.穿鞋套→戴口罩→穿防护服→戴护目镜→戴手套

答案：D

解析：正确顺序为：先穿鞋套（固定防护基础）→戴医用防护口罩（调整鼻夹）→穿防护服（拉好拉链、密封颈部）→戴护目镜/面屏（调整至合适位置）→戴双层手套（内层紧贴合手，外层覆盖防护服袖口）。

4.新冠样本保存运输时，若无法2小时内送检，应置于：

A.4℃冰箱（28℃）

B.20℃冰箱

C.室温（1825℃）

D.37℃孵箱

答案：A

解析：根据《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南（第四版）》，样本采集后应在2小时内送到实验室；若2小时内无法送检，应置于4℃（28℃）保存，保存时间不超过48小时；需长期保存则应置于70℃以下。

5.PCR实验室避免交叉污染的关键措施不包括：

A.各区专用设备（移液器、离心机等）

B.严格单向工作流程（试剂准备→样本处理→扩增→产物分析）

C.所有区域使用同一套清洁工具

D.每次实验后进行环境消毒（如紫外线照射、75%乙醇擦拭）

答案：C

解析：PCR实验室需分区使用专用清洁工具（如抹布、拖布），避免不同区域的工具交叉使用导致污染；其他选项均为关键防污染措施。

6.新冠检测实验室医疗废物处理时，感染性废物应装入：

A.黄色医疗废物袋（双层）

B.黑色生活垃圾袋

C.红色危险废物袋

D.蓝色可回收袋

答案：A

解析：新冠检测产生的感染性废物（如样本管、移液器吸头、防护服等）需装入双层黄色医疗废物袋，分层鹅颈式封口，标注“新冠病毒感染性废物”，暂存于专用暂存柜，由有资质的医疗废物处置单位48小时内转运。

7.进行新冠样本核酸提取时，若离心管意外破裂，正确的应急处理是：

A.立即用手清理碎片，再用75%乙醇消毒

B.停止操作，关闭生物安全柜，静置30分钟后，戴手套用吸水纸覆盖（含有效氯2000mg/L消毒液），作用30分钟后清理

C.直接用含氯消毒液喷洒，继续操作

D.打开生物安全柜风机最大档，快速吹散气溶胶

答案：B

解析：离心管破裂可能产生气溶胶，需立即停止操作，关闭生物安全柜风机（避免气溶胶扩散），静置30分钟让气溶胶沉降；随后戴手套用浸有2000mg/L有效氯消毒液的吸水纸覆盖污染区域，作用30分钟后清理，再用消毒液擦拭台面，最后紫外线照射30分钟。

8.PCR实验室空气质量检测的关键指标是：

A.二氧化碳浓度

B.尘埃粒子数（≥0.5μm）

C.温度（22±2℃）

D.相对湿度（50±10%）

答案：B

解析：PCR实验室属于生物安全二级实验室（BSL2），需符合《实验室生物安全通用要求》（GB194892008），其中空气质量关键指标为尘埃粒子数（≥0.5μm的粒子数≤352000个/m3），确保实验环境洁净度。

9.新冠病毒核酸检测结果判读时，“N基因阳性、ORF1ab基因阴性”的可能原因是：

A.样本中病毒载量极低，仅部分靶基因扩增

B.引物探针失效

C.扩增仪温度异常

D.样本被污染（如强阳性样本气溶胶污染）

答案：A

解析：新冠病毒核酸检测通常检测2个靶基因（如N、ORF1ab），若仅1个阳性，可能因病毒载量低（如处于感染早期），需结合Ct值（一般≤35）及临床症状复核；若Ct值＞35或重复检测仍单靶标阳性，需考虑假阳性可能（如污染）。

10.实验室工作人员发生职业暴露（如样本溅入眼内），应立即：

A.用生理盐水冲洗眼睛15分钟，报告负责人

B.用手揉搓眼睛，再用清水冲洗

C.继续完成实验后处理

D.自行服用抗病毒药物预防

答案：A

解析：职业暴露后需立即