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第2章组成细胞的分子
第1节细胞中化合物;
课题导入
根据你的生活经验,说说哪些植物器官的细胞
中富含糖类、脂质或蛋白质?怎样从植物器官
中提取这些化合物?
答案:植物的叶肉细胞、果实细胞和种子细胞中通常含有较多的糖类、脂质、蛋白质。
如:禾谷类的果实、种子中含淀粉较多;甘蔗的茎和甜菜的根含蔗糖较多;花生、芝麻的种
子中含脂质较多;大豆种子中含蛋白质较多。
提取方法:设法将细胞破碎,再将这些物质
提取出来。;
1.检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
2.组成细胞的物质的特殊性;
检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质;
脂肪+苏丹Ⅲ染液—→橘黄色
蛋白质+双缩脲试剂→紫色;
引导探究
常见的还原糖和非还原糖
1.还原糖:具有还原性的糖
常见还原糖:葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖
常见非还原糖:蔗糖、淀粉;
不能选绿色叶片、西瓜、血
1.还原糖的检测和观察液等材料,防止颜色的干扰。
选材:含糖量较高、白色或近于白色的植物组织
制浆选苹果或梨匀浆:富含还原
制备组织样液过滤(用单层纱布)糖且没有其他颜色干扰。
取液
刚配制的
颜色反应:待测组织斐林试剂
样液1mL
2mL
生成砖红色沉淀
呈现蓝色50~65℃温水
加热约2min
工Ⅱ甲乙
结论:组织样液中含有可溶性还原糖;
观察颜
色变化
观察颜
色变化;
蛋白质+Cu2±碱性环境紫色络合物
思考:鉴定蛋白质时,加入试剂B后,如果没有产生紫色反应,可能的原因是什么?
可能加入的双缩脲试剂B过量,CuSO?在碱性溶液中生成大量的蓝色Cu(OH)?絮状沉淀,会遮蔽实验中所产生的紫色,影响观察结果。;
蛋白质的检测和观察
选材与制备:蛋清稀释液或豆浆滤液(原则:富含蛋白质且色浅)
Y
显色待测组双缩脲试剂双缩脲试剂
反应:织样液A液1mL,摇匀B液4滴2mL
摇匀后
变成紫色;
双缩脲试剂最初是用来检测双缩脲的。
2分子尿素;
比较项目;
三、脂肪的检测和观察
1.原理
脂肪+苏丹Ⅲ染液→橘黄色
2.选材:富含脂肪且色浅;
实验步骤
脂肪的检测和观察
取材:花生种子(浸泡,去掉种皮,将子叶切成薄片,
(取最薄的切片,放在载玻片中央
制片滴2~3滴苏丹Ⅲ染液(染色3min)脂肪的检测结果去浮色(1~2滴体积分数为50%的酒精溶液)
制成临时装片(滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片)
低倍镜·
结论:圆形小颗粒呈橘黄色说明有脂肪存在;
※“三滴”:
※第一滴:2-3滴苏丹Ⅲ
※第二滴:1-2滴50%的酒精(洗浮色)
※第三滴:1滴清水(制片)
检测脂肪的实验是唯一用显微镜观察的实验
?为什么用酒精洗浮色?用水可以吗?
不行,因为苏丹Ⅲ溶于酒精,不溶于水;
注意事项:
※(1)、检测还原糖时应水浴50~65度加热
加热试管中的溶液时,用试管夹夹住试管上部,
放入盛开水的大烧杯中加热,注意试管底部不要接触烧杯底部,同时试管口不要朝向实验者,以免试管内溶液沸腾时冲出试管,造成烫伤。
检测还原糖实验是唯一要水浴加热的实验;
※注意事项:
※(2)、检测脂肪时,切片要薄,否则显微镜下可能会
看到一半清楚一半模糊的物像。
用苏丹Ⅲ染色时间不宜过短(染色不充分,脂肪颗粒
染色过浅,不宜观察);不宜过长(样品中的脂肪可能溶解,洗浮色时被洗掉,观察不到被染色的脂肪)
(3)唯一需要显微镜——脂肪鉴定,实验中要用50%的酒精溶液,其作用是洗去浮色;
※(4)、斐林试剂是甲乙两液等量混匀后立即使用
,即现配现用(放置时间过长会有沉淀析出,反应减慢或者不反应)。颜色变化:
浅蓝色→棕色→砖红色沉淀
※(5)、双缩脲试剂是先加如A液1ml,摇匀,再加入B液4滴,摇匀.颜色变化:
无色→浅蓝色→紫色;
目标升华
1、检测蛋白质时,加入B液后没有观察到紫色反应
有可能是因为B液过量,生成大量的
蓝色Cu(OH)?,遮盖了实验中产生的紫色
2、斐林试剂的乙液可以通过用蒸馏水稀释作为双缩脲试剂中的B液使用(或者减
少乙液用量)来检测蛋白质;
课堂练习
1、用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,
溶液颜色的变化过程是(D)
A、无色→砖红色(沉淀)
B、浅蓝色→砖红色(沉淀)
C、浅
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