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pcr上岗考试及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.PCR技术的中文全称是（）

A.聚合酶链式反应B.核酸扩增反应C.基因复制反应D.蛋白质合成反应

2.PCR反应体系中不包括以下哪种成分（）

A.模板DNAB.Taq酶C.dNTPD.限制性内切酶

3.PCR反应的基本步骤不包括（）

A.变性B.退火C.延伸D.转录

4.引物设计时，其长度一般为（）

A.5-10bpB.15-30bpC.30-50bpD.50-100bp

5.Taq酶的最适反应温度是（）

A.55℃B.72℃C.94℃D.60℃

6.以下哪种物质可以作为PCR反应的模板（）

A.蛋白质B.多糖C.DNAD.脂肪

7.PCR技术主要用于（）

A.蛋白质测序B.基因克隆C.细胞培养D.抗体检测

8.在PCR反应中，决定扩增片段特异性的是（）

A.Taq酶B.模板DNAC.引物D.dNTP

9.进行PCR反应时，需要使用的仪器是（）

A.离心机B.紫外可见分光光度计C.PCR仪D.气相色谱仪

10.关于PCR技术，下列说法错误的是（）

A.灵敏度高B.特异性强C.可扩增任意长度的DNA片段D.操作相对简便

答案：1.A2.D3.D4.B5.B6.C7.B8.C9.C10.C

二、多项选择题（每题2分，共20分）

1.PCR反应体系中包含的成分有（）

A.模板DNAB.引物C.Taq酶D.dNTPE.Mg2?

2.引物设计的基本原则包括（）

A.长度合适B.避免引物自身互补C.引物之间避免互补D.GC含量适中E.3’端不能有发夹结构

3.影响PCR反应的因素有（）

A.模板浓度B.引物浓度C.反应温度D.循环次数E.Taq酶活性

4.PCR技术的应用领域包括（）

A.疾病诊断B.法医鉴定C.基因工程D.物种鉴定E.药物研发

5.在PCR反应中，可能出现的问题有（）

A.假阳性B.假阴性C.扩增效率低D.引物二聚体形成E.非特异性扩增

6.以下哪些是常用的PCR缓冲液成分（）

A.Tris-HClB.KClC.MgCl?D.NaClE.EDTA

7.实时荧光定量PCR可以用于（）

A.基因表达分析B.病原体定量检测C.肿瘤标志物检测D.甲基化分析E.单核苷酸多态性检测

8.巢式PCR的优点有（）

A.提高特异性B.提高灵敏度C.减少非特异性扩增D.增加扩增片段长度E.降低引物设计难度

9.降落PCR的特点包括（）

A.提高特异性B.减少引物二聚体形成C.优化退火温度D.适用于未知序列扩增E.增加扩增效率

10.数字PCR的优势在于（）

A.绝对定量B.检测低丰度核酸C.不受PCR抑制物影响D.高通量E.可进行多重检测

答案：1.ABCDE2.ABCDE3.ABCDE4.ABCDE5.ABCDE6.ABC7.ABC8.ABC9.ABC10.ABC

三、判断题（每题2分，共20分）

1.PCR技术可以扩增RNA片段。（）

2.引物的GC含量越高，其退火温度越高。（）

3.Taq酶具有3’→5’外切酶活性。（）

4.PCR反应的循环次数越多，扩增产物的量就一定越多。（）

5.模板DNA的纯度对PCR反应结果没有影响。（）

6.实时荧光定量PCR可以对核酸进行绝对定量。（）

7.引物的5’端可以进行修饰。（）

8.降落PCR是在反应开始时采用较高的退火温度。（）

9.数字PCR不需要标准曲线即可进行定量分析。（）

10.PCR技术只能用于扩增已知序列的DNA片段。（）

答案：1.×2.√3.×4.×5.×6.√7.√8.√9.√10.×

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述PC