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pcr考试选择题及答案

一、单项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术的中文全称是（）

A.聚合酶链式反应

B.核酸内切酶反应

C.反转录反应

D.连接酶反应

答案：A

2.PCR反应体系中不包括以下哪种成分（）

A.模板DNA

B.引物

C.限制性内切酶

D.Taq酶

答案：C

3.引物设计时，其长度一般为（）

A.5-10bp

B.15-30bp

C.35-50bp

D.50bp以上

答案：B

4.Taq酶的最适反应温度是（）

A.55℃

B.72℃

C.94℃

D.37℃

答案：B

5.PCR反应的基本步骤不包括（）

A.变性

B.退火

C.延伸

D.转化

答案：D

6.下列关于模板DNA的说法错误的是（）

A.可以是基因组DNA

B.不能是线粒体DNA

C.可以是cDNA

D.纯度会影响PCR结果

答案：B

7.引物的Tm值一般要求在（）

A.40-50℃

B.50-60℃

C.60-70℃

D.70-80℃

答案：B

8.PCR技术的发明人是（）

A.孟德尔

B.克里克

C.穆利斯

D.沃森

答案：C

9.在PCR反应中，循环次数一般为（）

A.10-15次

B.15-20次

C.25-35次

D.40-50次

答案：C

10.进行PCR反应的仪器是（）

A.离心机

B.移液器

C.基因扩增仪

D.电泳仪

答案：C

二、多项选择题（每题2分，共10题）

1.PCR技术可应用于（）

A.基因克隆

B.疾病诊断

C.法医鉴定

D.物种鉴定

答案：ABCD

2.引物设计的原则包括（）

A.避免引物自身互补

B.引物之间不能互补

C.碱基分布均匀

D.引物长度合适

答案：ABCD

3.PCR反应体系的主要成分有（）

A.缓冲液

B.dNTPs

C.引物

D.模板DNA

答案：ABCD

4.影响PCR反应的因素有（）

A.模板浓度

B.引物浓度

C.反应温度

D.循环次数

答案：ABCD

5.以下哪些酶可用于PCR反应（）

A.Taq酶

B.Pfu酶

C.Klenow片段

D.反转录酶

答案：AB

6.PCR产物的检测方法有（）

A.琼脂糖凝胶电泳

B.聚丙烯酰胺凝胶电泳

C.测序

D.酶切分析

答案：ABCD

7.实时荧光定量PCR可以（）

A.定量分析起始模板量

B.检测基因表达水平

C.诊断疾病

D.进行SNP分析

答案：ABC

8.巢式PCR的优点有（）

A.提高特异性

B.提高灵敏度

C.减少非特异性扩增

D.无需引物设计

答案：ABC

9.多重PCR可同时扩增多个靶基因片段，其应用包括（）

A.病毒分型

B.遗传疾病诊断

C.肿瘤研究

D.环境监测

答案：ABCD

10.热启动PCR的作用是（）

A.减少非特异性扩增

B.提高扩增效率

C.降低引物二聚体形成

D.提高产物特异性

答案：ACD

三、判断题（每题2分，共10题）

1.PCR反应中引物与模板的结合是通过碱基互补配对原则。（）

答案：对

2.Taq酶具有3→5外切酶活性。（）

答案：错

3.引物的浓度越高，PCR反应效果越好。（）

答案：错

4.PCR反应中，变性温度越高越好。（）

答案：错

5.只要有模板DNA，就可以进行PCR反应。（）

答案：错

6.实时荧光定量PCR能对核酸进行绝对定量。（）

答案：对

7.巢式PCR需要两对引物。（）

答案：对

8.多重PCR可以同时扩增任意多个靶基因片段。（）

答案：错

9.热启动PCR可以在常温下配置反应体系。（）

答案：对

10.PCR产物的长度由引物的位置决定。（）

答案：对

四、简答题（每题5分，共4题）

1.简述PCR技术的基本原理。

答案：以模板DNA为基础，在引物、dNTPs、Taq酶等存在下，经高温变性使模板双链解开，低温退火让引物与模板结合，中温延伸由Taq酶催化合成新的DNA链，通过多次循环扩增目的DNA片段。

2.引物设计时需要注意哪些方面？

答案：要注意避免引物自身互补、引物间互补，碱基分布均匀，长度合适，Tm值在50-60℃左右，同时引物3端不能有错配，且不能形成引物二聚体等。

3.简述实时荧光定