马立克病的实验室诊疗琼扩试验.pptVIP

掌握鸡马立克病的实验室诊断方法;10×100mm试管若干只、玻璃棒（直径6～8mm、圆头长约16cm）4～6只。胶头吸管18～20只、烧杯或搪瓷缸4～6个，玻璃平皿、精制琼脂粉、打孔器（直径3mm和6mm）、8%pH7.2～7.4的钠、钾磷酸盐缓冲液、标准抗原、阳性血清等;方法步骤;（一）1%琼脂平板制备;（二）加样;2．检测血清抗体（被检鸡血清）

向中央孔滴加标准琼扩抗原

向周边孔滴加待检血清和有一孔加阳性血清

均以加满而不溢出为度;将加样后的琼脂平皿加盖后倒置平放于加盖的湿盒内，置37℃温箱中孵育，8～24h内观察并记录结果。;被检样品孔与中心孔之间形成清晰的沉淀线，并与周边已知抗原和阳性血清孔的沉淀线互相融合者，判为阳性

不出现沉淀线的判为阴性；

已知抗原与阳性血清之间所产生的沉淀线末端变向被检样品孔内侧时，则该被检样品判为弱阳性。

有的被检材料可能会出现两条以上沉淀线，其中一条与已知抗原——阳性血清的沉淀性融合者，仍判为阳性。;上述方法可用于20日龄以上鸡羽髓MDV抗原检测和1月龄以上鸡的血清抗体检测;课后作业