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生物医药疫苗纯化工程师岗位考试试卷及答案
一、单项选择题（每题2分，共20分）
1.以下哪种方法常用于蛋白质的初步分离（）
A.亲和层析B.离子交换层析C.离心D.超滤
2.疫苗生产中，常用的除菌过滤孔径是（）
A.0.22μmB.0.45μmC.1μmD.5μm
3.蛋白质在电场中移动的方向取决于（）
A.蛋白质的分子量B.蛋白质的等电点C.电场强度D.缓冲液浓度
4.以下哪种物质可作为离子交换层析的介质（）
A.琼脂糖B.葡聚糖C.纤维素D.以上都是
5.超滤的驱动力是（）
A.压力差B.浓度差C.电位差D.重力
6.疫苗纯化过程中，检测蛋白质含量常用的方法是（）
A.凯氏定氮法B.紫外分光光度法C.双缩脲法D.考马斯亮蓝法
7.亲和层析的原理是（）
A.离子交换B.分子筛C.特异性结合D.分配系数差异
8.以下哪种层析方法分辨率最高（）
A.凝胶过滤层析B.离子交换层析C.亲和层析D.疏水相互作用层析
9.疫苗纯化中，脱盐常用的方法是（）
A.透析B.超滤C.离子交换层析D.以上都是
10.蛋白质在等电点时（）
A.溶解度最大B.溶解度最小C.电荷最多D.电泳速度最快
二、多项选择题（每题2分，共20分）
1.疫苗纯化常用的层析方法有（）
A.离子交换层析B.凝胶过滤层析C.亲和层析D.疏水相互作用层析
2.影响蛋白质在离子交换层析中保留时间的因素有（）
A.蛋白质的电荷性质B.缓冲液的pH值C.缓冲液的离子强度D.层析柱的长度
3.超滤的优点包括（）
A.操作简便B.可连续操作C.能同时进行浓缩和分离D.对蛋白质活性影响小
4.以下哪些物质可用于疫苗的除菌过滤（）
A.微孔滤膜B.超滤膜C.反渗透膜D.核孔滤膜
5.蛋白质纯化过程中，常用的缓冲液有（）
A.磷酸盐缓冲液B.Tris-HCl缓冲液C.醋酸盐缓冲液D.碳酸盐缓冲液
6.亲和层析的配体可以是（）
A.抗体B.抗原C.酶的底物D.辅酶
7.凝胶过滤层析可用于（）
A.蛋白质的分离B.蛋白质的分子量测定C.蛋白质的脱盐D.蛋白质的浓缩
8.疫苗纯化过程中，需要控制的参数有（）
A.温度B.压力C.流速D.pH值
9.离子交换层析的类型有（）
A.阳离子交换层析B.阴离子交换层析C.两性离子交换层析D.强离子交换层析
10.蛋白质在溶液中的稳定性受哪些因素影响（）
A.温度B.pH值C.离子强度D.蛋白质浓度
三、判断题（每题2分，共20分）
1.离心是一种常用的蛋白质分离纯化方法，可用于去除细胞碎片等杂质。（）
2.离子交换层析中，缓冲液的离子强度越高，蛋白质的洗脱速度越快。（）
3.超滤可以完全去除溶液中的小分子杂质。（）
4.亲和层析的特异性很强，只适用于单一蛋白质的纯化。（）
5.凝胶过滤层析中，分子量大的蛋白质先被洗脱下来。（）
6.疫苗纯化过程中，所有操作都需要在无菌条件下进行。（）
7.蛋白质在等电点时，其溶解度最大。（）
8.离子交换层析的介质只能是人工合成的高分子材料。（）
9.超滤的截留分子量是指能完全截留的最小分子量。（）
10.疫苗纯化过程中，检测蛋白质纯度的方法只有一种。（）
四、简答题（每题5分，共20分）
1.简述离子交换层析的基本原理。
答案：离子交换层析基于蛋白质等生物大分子在不同pH条件下所带电荷不同。固定相是带有离子基团的介质，流动相为缓冲液。当样品进入层析柱，带不同电荷的蛋白质与固定相离子基团发生可逆性离子交换，依据电荷性质、数量以及缓冲液离子强度、pH等因素差异，蛋白质在柱中保留时间不同，从而实现分离。
2.简述超滤在疫苗纯化中的作用。
答案：超滤在疫苗纯化中，一方面可通过选择合适截留分子量的膜，将疫苗与小分子杂质如盐、氨基酸等分离，实现脱盐；另一方面能对疫苗溶液进行浓缩，提高其浓度，同时保留目标疫苗成分，操作相对温和，对疫苗活性影响较小，有利于后续纯化及制剂工艺。
3.简述亲和层析的优点。
答案：亲和层析优点显著。特异性极高，利用生物分子间特异性相互作用，如抗原-抗体、酶-底物等，能从复杂混合物中高效分离目标分子；分辨率高，可有效去除杂质；操作相对简便，条件温和，能较好保持生物分子活性，适用于多种生物分子纯化，尤其含量低、难分离的分子。
4.简述疫苗纯化过程中检测蛋白质纯度的常用方法。
答案：常用方法有SDS（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳），可根据蛋白质迁移条带判断纯度；HPLC（高效液相色谱），通过分离峰分析纯度；等电聚焦电泳，依据等电点差异分离蛋白质评估纯度；此外，还有紫外光谱法辅助判断，若在特定波长处无杂峰则纯度可能较高。
五、讨论题（每题5分，共20分）
1.讨论在疫苗纯化过程中，如何选择合适的层析方法。
答案：选择层析方法需综合多方面因素。首先依据目标疫苗的性质，如电荷特性选离子交换层析；有特异性结合配体
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