生化工艺第三章培养基的选择与灭菌.pptVIP

第六节????????培养基的灭菌方法及原理;一、灭菌的方法;控制有害微生物主要有以下几种措施;1、灭菌（sterilization）;第五页，共四十一页。;2、消毒（disinfection）;3、防腐（antisepsis）;4、化疗（chemotherapy）;1、化学试剂灭菌法;4、湿热灭菌法;灭菌方法

连线题;二、湿热灭菌原理;1、衡量热灭菌指标P51;从表中可看出;比较热阻

大小;第十六页，共四十一页。;受热时间如何确定？;2、微生物的死亡速率：对数残留定律P52;

式中，N—残存的活菌数；t—灭菌时间（s）；K—灭菌速度常数（s-1），也称反

应速度常数或比死亡速度常数，此常数的大小与微生物的种类与加热温度有关；

dN/dt—活菌数瞬时变化速率，即死亡速率。

积分得：

;1;3、灭菌温度和时间的选择;灭菌时，培养基成分分解速率常数K`与温度之间的关系也可用

阿累尼乌斯公式表示：;通过实验测定可知：

灭菌时杀死微生物的活化能大于培养基成分的破坏活化能值，

因此：;由此可见，若要减少营养成分的破坏，可升高温度灭菌。

结论2：在灭菌时选择较高的温度、较短的时间，这样便既可达到需要的灭菌程度，同时又可减少营养物质的损失。;问题;第七节培养基的湿热灭菌方式及灭菌时间的计算;在实际生产中，也可能遇到所供蒸汽不足、温度不够高的情况，这时可以适当延长灭菌时间。生产上甚至有用100℃蒸煮而达到彻底灭菌的实例。如要做固体曲而没有高温蒸汽时，可将原料用100蒸汽蒸30min，杀死其中的营养细胞，但孢子与细菌的芽孢没有被杀死。将蒸过的原料置于室温下过夜，未被杀死的孢子便发芽生长，芽孢发育成营养细胞，再30min便可杀死。如此连续反复进行2-3次，亦可达到彻底灭菌的目的。;2）间歇灭菌的操作;2、连续灭菌（连消）P57;发酵罐;;;3、间歇灭菌与连续灭菌的比较;二、灭菌时间计算与影响因素;例：有一发酵罐内装40m3培养基，在121温度下进行实罐灭菌。原污染程度为每1mL

有2*105个耐热细菌芽孢，121度时灭菌速度常数为1.8min-1。求灭菌失败机率为0.001时

所需要的灭菌时间。;【例2】上例中，灭菌过程的升温阶段，培养基从100℃上升至121℃，共需15min。求升温阶段结束时，培养基中芽孢数和保温所需时间。

解T1＝373KT2＝394K

根据公式求得373K至394K之间若干k值，k-T关系如下表

表k-T关系;根据公式，求升温阶段结束时培养基中残留的芽孢数为;B、连续灭菌（连消）

;【例】若将上例中的培养基采用连续灭菌，灭菌温度为131℃，此温度下灭菌速率常数为15min-1，求灭菌所需的维持时间。

解;2、影响灭菌的因素;谢谢大家！