FQPCR技术与儿科感染性疾病.pptxVIP

FQ-PCR技术与儿科感染性疾病中山大学达安基因股份有限公司市场部裴媛媛

达生命之源安健康之本主要内容1、聚合酶链式反应（PCR）的发展2、实时荧光定量PCR（FQ-PCR）的原理3、FQ-PCR与儿科感染性疾病（研究进展）4、达安公司儿科FQ-PCR相关产品

PCR的发明人——

加理·莫理斯（KaryB.Mullis）

达生命之源安健康之本/pcr.shtml

聚合酶链式反应PCR

（polymerasechainreaction）达生命之源安健康之本

达生命之源安健康之本PCR动力学原理——指数扩增

达生命之源安健康之本发射光实时荧光定量PCR(FluorescenceQuantitativePCR,FQ-PCR)实时荧光定量PCR是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监测整个PCR进程，最后通过软件标准曲线对起始模板进行定量分析的方法。

FQ-PCR原理简化图（simplifiedpictureofFQ-PCR）

达生命之源安健康之本FQ-PCR递增的荧光信号强度

检测范围广(101-1010拷贝数/毫升)实时数据监测荧光曲线高灵敏度、高特异性、高稳定性高准确性定量分析FQ-PCR特点

达生命之源安健康之本荧光阈值循环阈值（Ct值）

达生命之源安健康之本FQ-PCR扩增的理论模式理想PCR反应：X=X0*2n非理想PCR反应：X=X0(1+Ex)n

在扩增产物达到阈值线时:XCt=X0(1+Ex)Ct=M(1)logM=logX0(1+Ex)Ct(2)logX0=-log(1+Ex)*Ct+logM(3)数学原理推导过程

达生命之源安健康之本FQ-PCR定量原理图

达生命之源安健康之本FQ-PCR扩增曲线函数关系（1）起始模板量越多，达到荧光阈值的循环数就越少，即Ct值越小。（2）各模板起始拷贝数的对数（Log浓度）与Ct值呈线性反比关系，即起始模板量越多，Ct值越小。（3）通过已知起始拷贝数的标准品作出标准曲线，根据未知样品Ct值，就可以计算出该样品中所含的起始模板量。

达生命之源安健康之本FQ-PCR在儿科感染性疾病中的应用肺炎支原体（mycoplasmapneumoniae,MP）呼吸道合胞病毒（respiratorysyncytialvirus,RSV）人巨细胞病毒（humancytomegalovirus,HCMV）EB病毒（epstein-barrvirus,EBv）肠道病毒（enterovirus71,EV71coxsackievirus,CoxA16）

达生命之源安健康之本研究进展

达生命之源安健康之本肺炎支原体（mycoplasmapneumoniae,MP）CLINICALMICROBIOLOGYREVIEWS,Oct.2004,p.697–728

达生命之源安健康之本Science.2009Nov27;326(5957):1235-40.肺炎支原体（MP）蛋白质图谱绘制完成

达生命之源安健康之本Science：呼吸道合胞病毒三维图像（respiratorysyncytialvirus，RSV）Three-dimensional(3D)crystalstructureofadecameric,annularribonucleoproteincomplexoftheRSVnucleoprotein(N)boundtoRNA.Thevariableregionisinorange,withtheβ-hairpinhighlightedandlabeledwiththeRSV604resistancemutationsites.Science.2009Nov27;326(5957):1279-83.

达生命之源安健康之本人巨细胞病毒（humancytomegalovirus,HCMV）Newsand