第二章均相酶催化反应动力学.pptVIP

第2章第2节简单酶催化反应动力学（3）Eadie-Hofstee法（简称E-H法）八、动力学参数的求取Slope=-Km*第29页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2章第2节简单酶催化反应动力学八、动力学参数的求取4）积分法用不同的酶促反应的时间t与其反应过程相对应的底物浓度之间的函数关系通过作图或回归的方法确定酶促反应动力学参数。TheabovethreemethodsfordeterminingtheparametersarealsocalledindirectmethodordifferentialmethodbecauseofthersmaybeobtainedbyplottingCsagainsttimeandmakingthetangentlineandreadingtheslope(rs).Thesemethodsareinaccuracy.*第30页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2章第2节简单酶催化反应动力学八、动力学参数的求取4）积分法SubstitutingthosedataabouttimeandconcentrationindynamicsexperimentintotheM-Mequation,anewformequationcanbeobtained:P21式2-34Slope=rmax/Km*第31页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2章第2节简单酶催化反应动力学九、例题例1：在pH5.1、15℃下所测定的用葡萄糖淀粉酶水解麦芽糖的反应速度r如表所示。求这一酶促反应的动力学参数rmax和Km。表1-1葡萄糖淀粉酶水解麦芽糖的反应初速度与底物浓度CS（mmol/L）r0（mmol/L·min）5.550.1638.330.21111.110.24113.890.27616.660.30122.220.33927.770.347*第32页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2章第2节简单酶催化反应动力学解：采用Lineweaver-Burk法，对实验数据回归，有则*第33页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2章第2节简单酶催化反应动力学rr*第34页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2章第2节简单酶催化反应动力学采用Hanes-Woolf法，对实验数据回归，有则*第35页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2章第2节简单酶催化反应动力学rr*第36页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2章第2节简单酶催化反应动力学采用Eadie-Hofstee法，对实验数据回归，有则*第37页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2章第2节简单酶催化反应动力学r*第38页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2章第2节简单酶催化反应动力学例2葡萄糖在葡萄糖异构酶存在时转化为果糖的反应机理为:试分别用如下不同方法推导出反应速率方程：（ⅰ）平衡态近似法；（ⅱ）拟稳态近似法。*第39页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2章第2节简单酶催化反应动力学解：（ⅰ）平衡态近似法rP==k2cX－k－2cEcP(a)因为cE=cE,0－cX所以rP=k2cX－k2cP(cE,0－cX)(b)又，根据平衡态近似法(c)Ｃs*第40页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2章第2节简单酶催化反应动力学结合式(b)、(c)，得(d)将式(d)代入式(a)，得rP*第41页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2章第2节简单酶催化反应动力学（ⅱ）拟稳态近似法＝k1cEcS+k－2cEcP－k1cX－k2cX=0(a)又cE=cE,0－cX(b)将式(b)代入式(a)，得(c)*第42页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2章第2节简单酶催化反应动力学而rP==k2cX－k－2cEcP(d)把式(b)及(c)代入式(d)，得rP=(e)若k1k2和k－1k－2则rP=则*第43页，共74页，星期日，2025年，2月5日第2