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trp2+his2+tyr1+(供体)×trp2-his2-tyr1-(受体)
的转化类型及重组率计算例1:枯草杆菌共转化遗传作图第62页,共132页,星期日,2025年,2月5日trp2his2tyr13413连锁遗传图trp2his2tyr1341340第63页,共132页,星期日,2025年,2月5日在原核生物中,两个细胞在相互接触过程中,遗传物质从一个个体转移到另一个个体的现象称为接合。概念二、接合conjugation第64页,共132页,星期日,2025年,2月5日接合的发现J.LederbergE.Tatum大肠杆菌杂交试验(1946):结果:平板上长出原养型菌落(++++)。材料:大肠杆菌K12菌株的两个营养缺陷型品系:菌株A—甲硫氨酸缺陷型met-和生物素缺陷型bio-;菌株B—苏氨酸缺陷型thr-和亮氨酸缺陷型leu-方法:将A、B两菌株混和,在基本培养基(固体)上涂布培养。第65页,共132页,星期日,2025年,2月5日细菌的接合试验第66页,共132页,星期日,2025年,2月5日回复突变的排除单基因回复突变的频率约为10-6,双基因回复突变的频率则为10-12,频率很低。但试验中原养型菌落产生的频率非常高(10-7),因此基本可以排除回复突变的可能。第67页,共132页,星期日,2025年,2月5日互养作用的排除材料A品系:A-B+T1S(met-bio-thr+leu+T1S)B品系:A+B-T1R(met+bio+thr-leu-T1R)结论:表明互养并非原养型菌落出现的原因,而可能发生了遗传重组。试验方法:将A、B品系混合接种在基本培养基表面,短时间后喷噬菌体T1杀死A品系,使其不能持续产生thr与leu供B品系持续生长。结果:仍然出现原养型菌落。第68页,共132页,星期日,2025年,2月5日喷噬菌体T1杀死A菌第69页,共132页,星期日,2025年,2月5日转化作用的排除加热法加热第70页,共132页,星期日,2025年,2月5日戴维斯的U形管试验细胞直接接触是原养型细菌产生的必要条件。第71页,共132页,星期日,2025年,2月5日W.Hayes通过实验(1952)证明,在接合过程中遗传物质是一种单向的转移。即遗传物质从A菌株转移到了B菌株。供体(雄性)→受体(雌性)ABW.Hayes等进一步研究发现,A菌株之所以能成为供体,是因为它有一个性因子,即致育因子(fertilityfactor),简称F因子。目前研究表明F因子为环状DNA分子。第72页,共132页,星期日,2025年,2月5日E.ColiF因子的三种存在状态:Ⅰ、没有F因子——受体菌(雌性菌):不含有F因子的细菌,记为F-第73页,共132页,星期日,2025年,2月5日Ⅱ、游离状态的F因子——供体菌(雄性菌):含有F因子的细菌,F因子游离于宿主染色体外,记为F。+第74页,共132页,星期日,2025年,2月5日Ⅲ、整合的F因子-Hfr菌株(高频重组菌株):指F因子整合到宿主染色体中去了的菌株,其重组频率比F+高1000多倍。第75页,共132页,星期日,2025年,2月5日F因子的结构第76页,共132页,星期日,2025年,2月5日F因子的特点①F+细菌可以把F因子传给后代③F+可以和F-杂交,而不能和F+杂交。×第77页,共132页,星期日,2025年,2月5日④F+和F-杂交后代皆为F+,而且可以以10频率获得重组体后代。-7×第78页,共132页,星期日,2025年,2月5日性伞毛/接合管第79页,共132页,星期日,2025年,2月5日接合过程①、F因子的转移——低频重组F+×F-=F+F+重组通过质粒转移、复制进行。第80页,共132页,星期日,2025年,2月5日接合过程示意图第81页,共132页,星期日,2025年,2月5日高频重组高频重组细胞的形成第82页,共132页,星期日,2025年,2月5日②、Hfr细胞染色体的转移Hfr×F-=Hfr+F-Hfr×F-时,细菌基因的重组频率增加千倍。第83页,共132页,星期日,2025年,2月5日Hfr菌株的形成及其基因转移第84页,共132页,星期日,2025年,2月5日③、高频重组中基因的转移第85页,共132页,星期
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