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2025江西省病原微生物实验室生物安全远程培训答案

一、病原微生物分类与实验室分级管理

1.依据《病原微生物实验室生物安全管理条例》及《人间传染的病原微生物名录》，人间传染的病原微生物按危害程度分为四类。其中，第一类是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物（如天花病毒、埃博拉病毒等）；第二类是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物（如高致病性禽流感病毒、HIV1病毒等）；第三类是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物（如乙型肝炎病毒、结核分枝杆菌等）；第四类是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物（如大肠埃希菌K12菌株）。

2.实验室生物安全防护水平分为一级（BSL1）、二级（BSL2）、三级（BSL3）和四级（BSL4）。BSL1适用于操作第四类病原微生物；BSL2适用于操作第三类病原微生物及感染性材料；BSL3适用于操作第二类病原微生物；BSL4适用于操作第一类病原微生物。需特别注意，从事高致病性病原微生物实验活动，需经省级以上卫生或兽医主管部门批准，且实验活动需在相应等级的实验室中进行。例如，江西省内开展新冠病毒（属于第二类病原微生物）的分离培养工作，必须在BSL3实验室中进行，且需向江西省卫生健康委员会提交实验活动批准申请，经审核通过后方可实施。

二、实验室生物安全风险评估与控制

3.风险评估是实验室生物安全管理的核心环节，需遵循“识别分析评价控制”的基本流程。风险识别阶段需全面梳理实验活动涉及的病原微生物特性（如致病性、传播途径、耐药性）、操作过程（如离心、匀浆、接种）、设备设施（如生物安全柜性能、高压灭菌器有效性）、人员资质（如培训记录、健康状况）及环境因素（如实验室通风系统、应急照明）。风险分析需采用定性与定量结合的方法，例如通过矩阵法评估风险发生的可能性（低、中、高）与后果严重性（可忽略、中等、严重），确定风险等级。风险评价需对照国家及行业标准（如GB194892022《实验室生物安全通用要求》），判断现有控制措施是否充分。

4.风险控制措施需根据评估结果制定，遵循“消除替代工程控制管理控制个体防护”的优先顺序。例如，若实验中需处理高浓度结核分枝杆菌悬液，首先应考虑是否可通过降低培养浓度（替代）减少风险；若无法替代，则需在BSL3实验室的生物安全柜内操作（工程控制），同时要求操作人员完成结核菌素试验并接种卡介苗（管理控制），穿戴正压防护服（个体防护）。此外，需定期（至少每年一次）对风险评估进行回顾，当实验活动、人员、设备或法规发生变化时，需及时重新评估。

三、实验室生物安全操作规范

5.个人防护装备（PPE）的选择与使用需严格符合实验风险等级。BSL2实验室操作第三类病原微生物时，需穿戴一次性防护服（连体或分体）、手套（双层，外层为无粉乳胶或丁腈手套）、护目镜（防雾型）、N95口罩或医用外科口罩（根据气溶胶风险选择）。穿戴顺序为：先穿防护服（确保拉链闭合），戴口罩（调整鼻夹贴合），戴护目镜（确保无漏光），最后戴手套（手套需覆盖防护服袖口）。脱卸时需反向操作，避免污染：先摘手套（外层手套外翻脱下，内层手套同样处理），摘护目镜（手不触碰镜面），脱防护服（从颈部拉链处缓慢向下，避免接触外部污染面），最后摘口罩（手不触碰口罩外表面），所有使用后的PPE需放入专用医疗废物袋，经高压蒸汽灭菌（121℃，30分钟）后处理。

6.实验操作中需重点防范气溶胶产生。离心操作时，需使用密封离心管及带安全盖的转头，离心前检查离心管是否有裂缝，平衡误差不超过0.1g；离心结束后需等待转头完全停止，缓慢打开离心机盖，静置5分钟待气溶胶沉降后再取出样本。匀浆、振荡操作需在生物安全柜内进行，匀浆器需预先消毒，振荡速度不宜过高（≤2000rpm）。接种动物时，需使用麻醉剂（如异氟醚）降低动物应激反应，操作后立即对动物笼具及操作区域进行消毒（0.5%过氧乙酸擦拭）。

7.实验室废弃物分为感染性废物、病理性废物、化学性废物和放射性废物。感染性废物（如培养物、被污染的吸管）需装入黄色医疗废物袋（带有生物危害标识），置于专用防漏容器中，日产日清。高压蒸汽灭菌时需确保装载量不超过容器的3/4，温度、时间达标（121℃，30分钟或134℃，18分钟），灭菌后需检查指示卡是否变色以确认效果。化学性废物（如废弃的甲醛固定液）需分类收集于耐酸碱容器，标签注明成分、日期，委托有资质的危险废物处理公司处置。

四、实验室生物安全应急处置

8.实验室暴露事件包括锐器伤（如针刺伤）、黏膜