原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
微生物检验日常操作指南
一、概述
微生物检验是检测样品中微生物含量和种类的重要技术手段，广泛应用于食品、药品、环境、临床等领域。为确保检验结果的准确性、可靠性和一致性，必须遵循标准化的日常操作流程。本指南旨在提供一套系统化、规范化的微生物检验操作步骤，涵盖样品处理、培养基准备、接种培养、结果判读等关键环节。
二、样品处理
（一）样品采集
1.使用无菌工具（如无菌剪刀、镊子）采集样品，避免污染。
2.根据样品类型选择合适的采集方法：
(1)固体样品：取适量样品（如5-10克）放入无菌容器中。
(2)液体样品：使用无菌吸管吸取适量样品（如1-5毫升）转移至无菌瓶中。
3.采集后立即密封容器，并在2小时内送检。
（二）样品前处理
1.去除表面污染物：对植物、动物样品先清洗表面，再用无菌纸巾擦干。
2.均质化处理：
(1)固体样品：加入无菌生理盐水或缓冲液（如9克/升氯化钠溶液），用均质器充分研磨。
(2)液体样品：直接稀释或梯度稀释（如1:10、1:100稀释）。
3.备用样品保存：未使用的样品需冷藏（2-8℃）保存，24小时内检测完毕。
三、培养基准备
（一）培养基配制
1.称量：按配方称取培养基粉末（如胰酪大豆胨琼脂TSA），精确至±0.1克。
2.溶解：加入适量蒸馏水（如500毫升），搅拌至完全溶解。
3.分装：将培养基分装至无菌培养皿或试管中，每皿15-20毫升。
（二）灭菌处理
1.高压蒸汽灭菌：
(1)设置灭菌参数：温度121℃，压力1.05-1.21公斤/平方厘米，时间15-20分钟。
(2)灭菌后冷却至50-55℃，倾注培养皿。
2.干热灭菌：适用于玻璃器皿，温度160℃，时间2小时。
四、接种培养
（一）平板划线法
1.操作步骤：
(1)左手持菌种管，右手持接种环，火焰灭菌接种环。
(2)在平板表面划三区：第一区密集划线，第二区稀疏划线，第三区挑取单菌落。
(3)每次划线后火焰灭菌接种环，避免交叉污染。
2.培养条件：37℃恒温培养24-48小时。
（二）倾注法
1.操作步骤：
(1)取1-2毫升菌悬液加入无菌试管。
(2)倾入已灭菌的培养皿中，轻轻晃动混匀。
(3)静置凝固，倒置放入培养箱。
2.培养条件：35℃培养18-24小时。
五、结果判读
（一）菌落计数
1.使用菌落计数器（如平板计数法）：
(1)选择菌落分布均匀的平板（≥30个菌落）。
(2)计算每克/毫升样品的菌落数（CFU/g或CFU/mL）。
2.示例计算：若直径9厘米平板有150个菌落，则1克样品含约1.3×10^6CFU。
（二）形态观察
1.显微镜检查：
(1)涂片染色（如革兰染色），观察菌体形态（如球菌、杆菌）。
(2)记录特征（如大小、颜色、排列方式）。
2.非典型菌种需进一步生化实验确认。
六、质量控制
（一）空白对照
1.每批次检验需设置无菌培养基空白对照，排除污染。
2.若空白对照生长，需重新检验所有样品。
（二）阳性对照
1.使用已知菌种（如大肠杆菌）验证培养基活性。
2.阳性对照必须生长，否则检验无效。
（三）重复性检验
1.对可疑样品进行二次检测，确保结果一致。
2.菌落数波动超过20%需重新检验。
一、概述
微生物检验是检测样品中微生物含量和种类的重要技术手段，广泛应用于食品、药品、环境、临床等领域。为确保检验结果的准确性、可靠性和一致性，必须遵循标准化的日常操作流程。本指南旨在提供一套系统化、规范化的微生物检验操作步骤，涵盖样品处理、培养基准备、接种培养、结果判读等关键环节。
二、样品处理
（一）样品采集
1.使用无菌工具（如无菌剪刀、镊子）采集样品，避免污染。
2.根据样品类型选择合适的采集方法：
(1)固体样品：取适量样品（如5-10克）放入无菌容器中。
(2)液体样品：使用无菌吸管吸取适量样品（如1-5毫升）转移至无菌瓶中。
3.采集后立即密封容器，并在2小时内送检。
（二）样品前处理
1.去除表面污染物：对植物、动物样品先清洗表面，再用无菌纸巾擦干。
2.均质化处理：
(1)固体样品：加入无菌生理盐水或缓冲液（如9克/升氯化钠溶液），用均质器充分研磨。
(2)液体样品：直接稀释或梯度稀释（如1:10、1:100稀释）。
3.备用样品保存：未使用的样品需冷藏（2-8℃）保存，24小时内检测完毕。
（三）样品保存与运输
1.保存条件：
(1)液体样品：4℃冷藏，避免冻结。
(2)固体样品：使用无菌袋包裹，2-8℃保存。
2.运输要求：
(1)使用带盖容器，防止泄漏污染环境。
(2)标明样品信息（名称、采集时间、来源）。
三、培养基准备
（一）培养基配制
1.称量：按配方称取培养基粉末（如胰酪大豆胨琼脂
文档评论（0）