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土壤有机质测定实验操作步骤

土壤有机质作为土壤肥力的核心指标之一，其含量与土壤的保肥供肥能力、缓冲性能、结构状况及生物活性密切相关。准确测定土壤有机质含量，对于土壤肥力评估、培肥管理及农业可持续发展具有重要意义。本文将详细介绍采用重铬酸钾氧化-外加热法测定土壤有机质的操作流程，该方法因准确性较高、重现性好而被广泛应用于土壤分析实践中。

一、实验原理概述

本方法基于在加热条件下，土壤有机质中的碳被已知浓度的重铬酸钾-硫酸溶液氧化为二氧化碳，而重铬酸钾中的六价铬被还原为三价铬。剩余的重铬酸钾用硫酸亚铁标准溶液滴定，根据消耗的重铬酸钾量计算出有机碳的含量，再乘以经验系数（通常为1.724），即可得到土壤有机质的含量。此反应过程需在严格控制的温度和时间条件下进行，以确保氧化反应的完全性和测定结果的可靠性。

二、主要试剂与仪器准备

（一）实验试剂

1.重铬酸钾标准溶液：称取经过130℃烘干至恒重的分析纯重铬酸钾，精确称量后溶于蒸馏水中，移入容量瓶定容，配制成一定摩尔浓度的标准溶液。该溶液具有强氧化性，配制时需注意安全，避免接触皮肤和衣物。

2.硫酸亚铁标准溶液：称取分析纯硫酸亚铁（或硫酸亚铁铵）溶于适量蒸馏水中，加入一定量的浓硫酸以防止水解，然后移入容量瓶定容。此溶液浓度不稳定，需在使用前用重铬酸钾标准溶液进行标定。

3.邻菲啰啉指示剂：称取邻菲啰啉与硫酸亚铁溶于蒸馏水中，配制成指示剂溶液，用于滴定终点的判断。

4.浓硫酸：分析纯，具有强腐蚀性，操作时务必小心。

（二）实验仪器

1.油浴锅：控温精度需满足实验要求，用于提供稳定的加热环境。

2.硬质试管：规格应与油浴锅相匹配，耐高温。

3.试管夹、铁丝笼：用于固定和放置试管。

4.分析天平：感量需达到万分之一，用于精确称取样品和试剂。

5.移液管、容量瓶、烧杯、滴定管等：均需符合分析实验要求，并经过校准。

6.温度计：用于监测油浴温度。

三、土壤样品制备

供试土壤样品需经过严格的制备过程，以保证其代表性和均匀性。首先将野外采集的新鲜土样去除植物残体、石块等杂物，经自然风干后，用研钵研磨，通过一定孔径的筛子（通常为100目）。过筛后的土样应充分混匀，装入洁净的广口瓶中备用，并贴上标签注明样品信息。样品制备过程中，应避免引入外源有机物质污染。

四、实验操作步骤

（一）称样与加液

用分析天平准确称取一定量的土样（视有机质含量高低而定，通常为0.1-0.5克），精确至小数点后四位。将称取的土样小心移入干燥的硬质试管底部，注意避免土样沾附在试管壁上。用移液管准确加入一定体积的重铬酸钾标准溶液，再沿试管壁缓慢加入等量的浓硫酸，轻轻摇匀。此时试管内会放出大量热量，溶液温度升高，并有橙红色烟雾产生，此为正常现象。

（二）加热消煮

将装有土样和试剂的试管放入预先加热至____℃的油浴锅中，使试管内液面低于油面。同时，做两个空白实验，即试管中只加入等量的重铬酸钾标准溶液和浓硫酸，不加土样，同样进行加热消煮，以消除试剂本身可能带来的误差。待试管内溶液沸腾（通常在放入油浴后约5-10分钟）开始计时，保持油浴温度稳定，消煮一定时间（通常为5分钟）。消煮过程中，应密切关注油浴温度和试管内溶液状况，防止溶液暴沸或溅出。

（三）冷却与滴定

消煮结束后，立即用试管夹将试管从油浴锅中取出，小心放在试管架上冷却。待试管冷却至室温后，将管内溶液连同残渣一起用蒸馏水仔细洗入锥形瓶中，注意冲洗试管壁至无残留颜色，总体积控制在____毫升左右。加入2-3滴邻菲啰啉指示剂，此时溶液呈橙黄色。用硫酸亚铁标准溶液进行滴定，滴定过程中要不断摇动锥形瓶，溶液颜色会逐渐由橙黄经蓝绿变为砖红色，即达到滴定终点。记录消耗硫酸亚铁标准溶液的体积。

五、结果计算与表示

土壤有机质含量（%）按以下公式计算：

有机质（%）=[(V0-V)×C×M×1.724×100]/(m×1000)

式中：

V0：空白实验消耗硫酸亚铁标准溶液的体积（毫升）；

V：样品测定消耗硫酸亚铁标准溶液的体积（毫升）；

C：硫酸亚铁标准溶液的摩尔浓度（摩尔/升）；

M：碳的摩尔质量（12克/摩尔）；

1.724：将有机碳换算为有机质的经验系数（假设土壤有机质中碳的平均含量为58%）；

m：土样质量（克）；

1000和100：单位换算系数。

计算结果保留两位小数。通常要求进行平行实验（一般为2-3次），取其算术平均值作为最终结果，并计算相对标准偏差以评估测定精密度。

六、注意事项

1.安全第一：实验中涉及浓硫酸和高温油浴，操作时必须穿戴实验服、防护眼镜和手套。浓硫酸稀释时应将酸缓慢加入水中，严禁反向操作。油浴锅使用时需注意控温，防止油温过高引发火灾。

2.样品代表性：土壤样品的采集和制备过程对测定结果影响