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微生物检验样品处理规程

一、总则

微生物检验样品处理是确保检验结果准确性和可靠性的关键环节。本规程旨在规范样品的采集、运输、保存、制备和前处理流程，以减少微生物污染和损失，保证检验结果的有效性。所有参与样品处理的人员应严格遵守本规程，确保操作规范、记录完整。

二、样品采集

（一）基本原则

1.选择具有代表性的样品。

2.使用无菌、无菌包装的采样工具和容器。

3.避免样品在采集过程中受到污染。

4.样品采集后应立即进行处理或冷藏保存。

（二）采样工具与容器

1.采样工具：无菌棉签、取样勺、注射器等。

2.容器：无菌试管、无菌袋、无菌瓶等，需根据样品类型选择合适的容器。

（三）采样方法

1.液体样品：用无菌吸管或注射器吸取适量样品，立即注入无菌容器中。

2.固体样品：用无菌取样勺或棉签蘸取表面样品，放入无菌容器中。

3.空气样品：使用无菌采样器或平板暴露法采集空气中的微生物。

三、样品运输与保存

（一）运输要求

1.样品运输应使用保温箱或冷藏箱，温度控制在2℃～8℃。

2.易腐样品应尽快送达实验室，避免延误。

3.运输过程中应避免样品容器破损或泄漏。

（二）保存方法

1.液体样品：冷藏保存（2℃～8℃），保存时间不超过24小时。

2.固体样品：冷藏保存，可添加无菌生理盐水防止干燥。

3.需要长期保存的样品可冷冻保存（-20℃以下）。

四、样品制备与前处理

（一）液体样品制备

1.取样：使用无菌吸管吸取1mL～10mL样品，加入无菌生理盐水或缓冲液中稀释。

2.稀释：根据样品污染程度，进行梯度稀释（如1:10、1:100等）。

3.均质：充分混匀样品，确保稀释液与样品充分混合。

（二）固体样品制备

1.刮取：用无菌刮刀刮取表面样品，放入无菌容器中。

2.匀浆：将固体样品与无菌生理盐水混合，使用均质器充分匀浆。

3.稀释：取匀浆液进行梯度稀释。

（三）表面样品制备

1.擦拭：用无菌棉签擦拭样品表面，将棉签放入含生理盐水的试管中充分洗脱。

2.混合：振荡试管，确保棉签上的微生物充分悬浮。

五、注意事项

（一）操作规范

1.所有操作应在超净工作台或生物安全柜内进行。

2.操作前需洗手消毒，并穿戴无菌手套。

3.避免样品与手或其他非无菌物品接触。

（二）记录要求

1.记录样品编号、采集时间、运输时间、处理时间等信息。

2.记录样品制备过程中的稀释倍数、均质方法等关键参数。

3.保存所有记录，以备后续核查。

（三）异常处理

1.如发现样品污染，应立即废弃并重新采样。

2.如样品在运输过程中出现变质，应立即通知实验室并记录情况。

六、附则

本规程适用于各类微生物检验样品的处理，所有相关人员应定期接受培训，确保操作符合标准。本规程由实验室质量管理部门负责解释和修订。

一、总则

微生物检验样品处理是确保检验结果准确性和可靠性的关键环节。本规程旨在规范样品的采集、运输、保存、制备和前处理流程，以减少微生物污染和损失，保证检验结果的有效性。所有参与样品处理的人员应严格遵守本规程，确保操作规范、记录完整。

二、样品采集

（一）基本原则

1.选择具有代表性的样品：采集样品时，应确保样品能够真实反映被检对象的微生物状况。例如，采集土壤样品时，应在不同区域多点取样，混合均匀后取代表性样品。

2.使用无菌、无菌包装的采样工具和容器：采样工具和容器必须经过灭菌处理，避免外源微生物污染。常用灭菌方法包括高压蒸汽灭菌（121℃，15分钟）和干热灭菌（160℃，2小时）。

3.避免样品在采集过程中受到污染：采样时应避免接触非无菌表面，如手、衣物等，必要时佩戴手套。

4.样品采集后应立即进行处理或冷藏保存：避免样品在室温下放置时间过长，特别是易腐败的样品，应立即冷藏或冷冻保存。

（二）采样工具与容器

1.采样工具：

-无菌棉签：用于擦拭或采集少量样品。

-取样勺：用于采集固体样品，如土壤、食品等。

-注射器：用于采集液体样品，如水样、发酵液等。

-玻璃刮刀：用于刮取表面样品，如金属、塑料等。

2.容器：

-无菌试管：适用于液体样品的采集和保存。

-无菌袋：适用于较大体积的固体样品或半固体样品。

-无菌瓶：适用于需要添加保存液或培养基的样品。

（三）采样方法

1.液体样品：

-使用无菌吸管或注射器吸取适量样品（如1mL～10mL），立即注入无菌容器中。

-若样品浑浊，需先进行离心（如3000rpm，5分钟）去除杂质，再取上清液进行检验。

2.固体样品：

-用无菌取样勺或棉签蘸取表面样品，放入无菌容器中。

-对于块状样品，应从不同部位取若干小块，混合均匀后取代表性样品。

3.空气样品：

-使用无菌采样器：将采样头暴露在空气中特定时间（如10分钟），收集空气中的微生物。

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