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高二生物实验操作步骤教案

一、实验名称

观察植物细胞的质壁分离与复原

二、实验目的

1.理解植物细胞发生质壁分离与复原的原理。

2.学会制作植物细胞临时装片，并使用显微镜观察细胞的质壁分离与复原现象。

3.观察并描述植物细胞在不同外界溶液环境中的形态变化，加深对细胞吸水和失水原理的理解。

4.初步培养学生的实验操作技能、观察能力和分析实验现象的能力。

三、实验原理

植物细胞的原生质层（细胞膜、液泡膜以及两层膜之间的细胞质）相当于一层半透膜。当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原生质层进入外界溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的伸缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来，也就是发生了质壁分离。

当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，外界溶液中的水分就透过原生质层进入细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。

四、实验材料与用具

1.实验材料：紫色洋葱鳞片叶（外表皮细胞的液泡呈紫色，便于观察）。

2.实验用具：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管、吸水纸、培养皿（或小烧杯）。

3.实验试剂：质量浓度为较高浓度的蔗糖溶液（可使细胞较快发生质壁分离）、清水。

五、实验步骤

（一）制作洋葱鳞片叶外表皮临时装片

1.取材：用镊子从洋葱鳞片叶内侧撕取一小块（约0.5cm×0.5cm）透明的外表皮。注意选材要薄而透明，且尽量不带叶肉。若撕下的表皮带有较多叶肉，可用镊子轻轻刮除。

2.制片：在洁净的载玻片中央滴一滴清水。将撕取的洋葱外表皮展平在载玻片中央的清水中，注意避免产生褶皱。用镊子夹起盖玻片，使它的一边先接触载玻片上的水滴，然后缓缓地放下，盖在要观察的材料上，以避免盖玻片下出现气泡。

（二）观察正常的洋葱鳞片叶外表皮细胞

1.将制作好的临时装片放在显微镜的载物台上，用低倍物镜进行观察。调节粗准焦螺旋和细准焦螺旋，直至看到清晰的细胞图像。

2.识别细胞的细胞壁、细胞膜（紧贴细胞壁，不易分辨）、细胞质、液泡（紫色）等结构。注意观察液泡的大小和原生质层的位置。选取一个细胞结构清晰、液泡较大的视野，做好观察记录（可画图或文字描述）。

（三）观察植物细胞的质壁分离现象

1.滴加蔗糖溶液：从盖玻片的一侧滴入较高浓度的蔗糖溶液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。重复几次，确保洋葱表皮细胞完全浸润在蔗糖溶液中。

2.观察质壁分离过程：立即将装片放回显微镜下，先用低倍镜观察，注意细胞形态的变化，特别是液泡大小和颜色的变化以及原生质层与细胞壁的位置关系。可以转换到高倍镜下仔细观察一个典型细胞的质壁分离过程。

*预期现象：随着时间推移，可以看到液泡逐渐变小，颜色逐渐变深，原生质层（细胞膜和液泡膜之间的部分）与细胞壁逐渐分离，出现质壁分离现象。记录观察到的现象。

（四）观察植物细胞的质壁分离复原现象

1.滴加清水：在盖玻片的一侧滴入清水，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。重复几次，以洗去蔗糖溶液，使洋葱表皮细胞浸润在清水中。

2.观察质壁分离复原过程：将装片再次放回显微镜下，用低倍镜（必要时换高倍镜）观察细胞形态的变化。

*预期现象：可以看到液泡逐渐变大，颜色逐渐变浅，原生质层逐渐恢复原状，重新紧贴细胞壁，即发生质壁分离复原。记录观察到的现象。

（五）实验结束与整理

1.实验观察完毕，将显微镜复原（物镜偏到两旁，镜筒下降至最低处），清洁载玻片和盖玻片，整理实验台。

六、实验现象的观察与记录

实验阶段

液泡大小变化

液泡颜色变化

原生质层与细胞壁的位置关系

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初始状态（清水）

质壁分离（蔗糖）

质壁分离复原（清水）

*绘图：在下方空白处绘制观察到的典型细胞在初始状态、质壁分离状态和质壁分离复原状态下的简图，并标注主要结构（细胞壁、细胞膜、细胞质、液泡、细胞核若可见）。

七、实验结论与讨论

1.实验结论：

*当植物细胞处于较高浓度的蔗糖溶液中时，细胞失水，发生质壁分离。

*当已发生质壁分离的植物细胞处于清水中时，细胞吸水，发生质壁分离复原。

*上述现象证明了原生质层具有选择透过性，相当于一层半透膜，并且细胞的吸水和失水取决于细胞液与外界溶液的浓度差。

2.讨论：

*为什么选用紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞作为实验材料？如果选用无色的洋葱鳞片叶内表皮细胞，实验效果如何？可以采取什么措施改进？

*若蔗糖溶液浓度过高或过低，对实验结果会有什么影响？

*发生质壁分离的细胞，其“质”和“壁”分别指什么结构？

*如果在观