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动物学实验做法规定

一、实验准备

(一)实验器材与试剂准备

1.清点并检查所有实验器材是否完好,如解剖盘、手术剪、镊子、显微镜等。

2.准备所需试剂,包括生理盐水、消毒液(如碘伏)、固定液(如福尔马林)等,并确保浓度和数量符合实验要求。

3.预先配置好染色剂(如苏木精、亚甲基蓝),并按实验步骤分装备用。

(二)实验动物准备

1.选择健康、规格统一的实验动物,如小白鼠、青蛙等,确保其生理状态良好。

2.根据实验需求进行标记(如编号、翅号),并记录其基本信息(如年龄、体重)。

3.实验前24小时禁食,但不禁水,以减少干扰。

二、实验操作规范

(一)基本操作步骤

1.**消毒与麻醉**

(1)使用75%酒精对实验动物进行全身消毒,重点清洁手术区域。

(2)根据实验动物种类选择合适的麻醉方式(如吸入性麻醉、肌肉注射麻醉),并严格控制麻醉剂量。

2.**解剖与观察**

(1)在解剖台上铺好无菌垫巾,按标准解剖顺序(如皮肤→肌肉→内脏)进行操作。

(2)使用手术器械轻柔分离组织,避免损伤目标器官。

(3)通过解剖镜或显微镜实时观察并记录结构特征。

3.**样本采集与处理**

(1)按实验需求采集样本(如组织切片、细胞培养),确保操作无菌。

(2)样本立即浸泡于固定液中,或进行速冻保存。

(3)根据后续分析需求,对样本进行染色或制备载玻片。

(二)安全注意事项

1.操作过程中需佩戴护目镜、手套,防止试剂或生物样本接触皮肤。

2.动物麻醉期间需定时检查生命体征,确保其未出现窒息等危险状况。

3.实验结束后,所有器材需用消毒液彻底清洗并高温灭菌。

三、实验记录与整理

(一)数据记录要点

1.详细记录实验条件(如温度、湿度、试剂浓度)。

2.以表格形式记录动物反应(如呼吸频率、行为变化)。

3.绘制器官结构示意图,标注关键解剖特征。

(二)废弃物处理

1.实验动物尸体需统一收集于专用容器,并按生物安全规定进行无害化处理。

2.化学试剂残留需用大量清水冲洗,确保无污染后排放。

(三)实验报告撰写

1.按照标准格式(引言、方法、结果、讨论)整理实验内容。

2.数据分析需采用统计学方法,确保结果可靠性。

3.报告需经导师审核后方可归档。

一、实验准备

(一)实验器材与试剂准备

1.**清点与检查实验器材**

(1)**解剖类器材**:逐件检查解剖盘、解剖台是否清洁、稳固;手术剪、手术刀是否锋利无锈蚀,刀片安装是否牢固;各种型号的镊子(如组织镊、眼科镊)是否夹持灵活、无断裂;止血钳是否开关顺畅、齿纹清晰。

(2)**观察类器材**:显微镜应调整至光学系统无尘、物镜与载物台距离适宜;若需显微摄影,需确认相机接口、光源亮度可调。

(3)**测量类器材**:电子天平需校准,精度达到0.1g;刻度移液管、容量瓶需检漏,确保刻度线清晰。

(4)**防护用品**:检查实验服是否无破损、透气;一次性手套是否完好无损、符合实验生物安全级别(如二级);护目镜需无裂纹、能完全遮盖眼部。

2.**准备与配置试剂**

(1)**生理支持液**:配制0.9%氯化钠溶液,需使用去离子水或蒸馏水,按1gNaCl加入100mL水的比例称量溶解,用无菌滤膜过滤除菌。

(2)**消毒灭菌剂**:碘伏原液(有效碘浓度5%)需现配现用或冷藏保存;75%乙醇需用专用喷壶分装,避免挥发损耗。

(3)**固定与保存液**:福尔马林(40%甲醛溶液)需标注配制日期,浓度按实验需求稀释(如10%固定液);乙醇梯度(70%、80%、95%、100%)需用容量瓶精确配制,用于组织脱水。

(4)**染色剂**:苏木精-伊红(HE)染色液需按说明书比例混合,pH值用精密pH试纸调至6.0-6.8;若使用特殊染色,需提前确认染料纯度(如硝酸银用于银染)。

(二)实验动物准备

1.**动物来源与筛选**

(1)优先选用标准化实验动物,如SPF级小白鼠(体重20±2g,月龄6-8周),需提供出生证明、检疫合格报告。

(2)根据实验目的选择性别比例(如内分泌实验需纯合子雌鼠),记录个体编号、毛色、行为特征等基本信息。

2.**环境适应与预处理**

(1)动物运输后需放置于安静、温度(22±2℃)恒定的独立笼位,适应环境3天以上。

(2)实验前12小时禁食(不禁水),以减少手术中胃肠道干扰;若需空腹血糖测定,需禁食8-10小时。

(3)对需注射染料的动物,需预先进行尾静脉通路训练,确保穿刺成功率高。

3.**编号与标识**

(1)采用非侵入性标记法:如耳缘剪毛编号、尾部皮肤烙印(需麻醉下操作)、或植入微型芯片(适用于长期追踪实验)。

(2)所有标记需使用不易褪色的记号笔或专用墨水,并建立动物档案卡。

二、实验操作规范

(一)

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