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第2章细胞工程第1节植物细胞工程
应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。原理和方法操作水平目的分类细胞生物学、分子生物学和发育生物学细胞器、细胞或组织水平获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品植物细胞工程和动物细胞工程细胞工程
植物细胞工程的发展历程科技探索之路1902年,哈珀兰特提出了细胞全能性的理论,但相关的实验尝试没有成功。1958年,斯图尔德等发现胡萝卜的体细胞可以分化为胚,为细胞全能性理论提供了强有力的支持。1960年,科金用真菌的纤维素酶分解番茄根的细胞壁,成功获得了原生质体。1964年,古哈等在培养毛曼陀罗的花药时,首次得到了由花药中的花粉发育而来的胚。1971年,卡尔森诱导烟草种间原生质体融合,获得了第一株体细胞种间杂种植株。1974年,土壤农杆菌的Ti质粒被发现。之后该质粒应用于植物分子生物学领域,促进植物细胞工程与分子生物学技术的紧密结合。
从社会中来其芽葺葺其叶青青犹绿衣郎挺节独立可敬可慕迨夫花开凝晴瀼露万态千妍薰风自来四坐芬郁岂非入兰室乎!岂非有国香乎!这是我国历史上第一部兰谱——《金漳兰谱》(宋?赵时庚)中对兰花的一段描述从古至今,我国人民都把兰花看作高洁、典雅的象征,很多人喜欢养兰花。但是,兰花种子通常发育不全,在自然条件下萌发率极低;传统分株繁殖的方法又存在繁殖周期长、繁殖率低等问题,如果靠自然繁殖,兰花的价格可想而知了,如何能让名贵的兰花大量、快速地繁殖,从而走入寻常百姓家呢?
01植物细胞工程的基本技术
细胞经分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能,即细胞的全能性。植物组织培养的基本原理为什么植物组织或细胞能培养成完整植物体?一、植物组织培养技术
1.体细胞具有全能性的根本原因是什么?每个体细胞都含有该物种全部的遗传信息。受精卵体细胞部分生殖细胞体细胞植物细胞动物细胞2.生物体所有细胞全能性大小都一致吗?与细胞分化的关系怎样?一、植物组织培养技术一般情况下,随着细胞分化程度的不断提高,细胞的全能性逐渐降低。3.是不是所有的活细胞都具有全能性?不是;例如哺乳动物成熟的红细胞、植物成熟的筛管细胞
生物体内的细胞在特定的时间和空间条件下,细胞中的基因会选择性的表达,即发生细胞分化。如芽原基的细胞只能发育为芽,叶原基的细胞只能发育为叶。5.表现出全能性的条件?①离体②一定的营养物质、植物激素③适宜的温度、pH等外界条件④无菌环境一、植物组织培养技术4.在生物的生长发育过程中,是所有的细胞都表现出全能性吗?如果不是,为什么?
指将离体的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成完整植株的技术。(1)植物组织培养的概念统称外植体有丝分裂植物细胞工程的基本技术无性生殖地位生殖方式分裂方式原理植物细胞的全能性一、植物组织培养技术
(2)植物组织培养的流程图接种外植体诱导愈伤组织诱导生芽诱导生根移栽成活一、植物组织培养技术
胚状体途径类似胚的结构胚状体一、植物组织培养技术
①实验原理外植体愈伤组织芽、根完整植株脱分化再分化生长发育植物细胞一般具有全能性。1.植物组织培养的过程脱分化再分化让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化的细胞的过程。(一般不需要光照)排列疏松无而无规则,是一种高度液泡化的,不定形的薄壁组织团块。愈伤组织愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。(需要给予适当时间和强度的光照)探究?实践菊花的组织培养
2.植物激素的作用生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。它们的浓度、比例都会影响植物细胞的发育方向。生长素/细胞分裂素结果比值高(1)比值低(1)比值适中(=1)有利于根的分化,抑制芽的形成有利于芽的分化,抑制根的形成促进愈伤组织的形成简记:“高”根,“低”芽,“中”愈伤细胞分裂素生长素芽分化愈伤组织根分化探究?实践菊花的组织培养
目的(1)了解植物组织培养的基本原理(2)了解生长素和细胞分裂素的浓度、用量比例对菊花愈伤组织形成和分化的影响(3)尝试进行植物组织培养材料(1)外植体:幼嫩的菊花茎段(细胞分裂旺盛,容易脱分化表达全能性)(2)体积分数为70%的酒精:对手、超净工作台、外植体进行消毒(3)质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液:(4)无菌水:清洗外植体MS培养基有机营养如蔗糖(提供碳源和能源,调节渗透压)、植物激素(生长素、细胞分裂素等)、天然附加物、水、无机营养(大量元素、微量元素)、利用其强氧化性消毒探究?实践菊花的组织培养
外植体的消毒外植体的切段接种外植体诱导愈伤组
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