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诊断学实验操作指导本指导将帮助您掌握诊断学实验操作的基本技能和规范。通过系统学习,您将成为一名合格的医学检验人员。请仔细阅读每个实验步骤,确保操作准确无误,数据记录完整。作者:
课程介绍基本概念诊断学实验是医学诊断的基础。它通过实验方法获取客观数据,为临床诊断提供科学依据。课程目标掌握常规检验操作技能。培养严谨实验态度。建立临床思维能力。提高实验安全意识。评分标准操作规范性占40%。数据准确性占30%。记录完整性占20%。实验报告占10%。实验室规则严格遵守安全规范。保持环境整洁。爱护仪器设备。实验完成后及时清理。
实验室安全规范通用安全守则实验前阅读安全手册。禁止饮食。保持通风良好。遵守操作规程。勿在无人监督时操作。个人防护装备必须穿戴实验服。配戴防护眼镜。使用一次性手套。处理危险物质时使用口罩。危险品处理化学品按类别存放。生物样本专用容器处理。废液集中收集。溅出物立即处理。紧急应对熟记应急出口位置。掌握灭火器使用方法。了解洗眼器位置。发生意外立即报告。
基础实验器材介绍玻璃器皿试管:用于盛装少量液体样本烧杯:大容量液体混合和加热移液管:精确量取液体容量瓶:配制精确浓度溶液电子设备离心机:分离混合物组分分析天平:精确称量恒温水浴锅:控温反应酸度计:精确测量pH值测量仪器比色皿:光度测定血球计数板:细胞计数温度计:监测温度量筒:测量液体体积
样本采集基础血液样本采集选择合适静脉。消毒皮肤。绑扎止血带。正确使用采血针。按顺序采集不同试管。尿液样本收集提供清洁容器。指导中段尿收集法。收集晨尿效果最佳。样本应在2小时内检测。组织样本保存立即置入固定液。保持适当液固比例。标记完整信息。避免样本干燥。污染预防操作前彻底洗手。避免采样容器开口长时间暴露。防止交叉污染。标本不合格应重新采集。
血液样本处理全血收集选择适当抗凝剂试管。采血后立即轻轻颠倒混匀8-10次。禁止剧烈震荡避免溶血。静置时间血清分离需静置30分钟。让血液自然凝固。避免振动。保持室温。离心分离3000rpm离心10分钟。确保离心机平衡。分离血清或血浆上层。避免红细胞污染。分装保存使用无菌吸管转移。分装至小管。密封保存。血清4℃保存不超过24小时。
尿液检查基础物理性质检查观察颜色、透明度。测量比重和pH值。记录尿量。注意异常气味。化学性质检查使用尿试纸条检测。观察蛋白质、糖分、酮体含量。检测尿胆原和胆红素。记录亚硝酸盐情况。尿沉渣镜检1500rpm离心10分钟。弃上清保留沉淀。涂片制备。低倍和高倍镜下观察。结果判读对照参考值范围。记录异常细胞种类和数量。观察结晶形态。分析临床相关性。
显微镜操作技术目镜调节调整目镜间距。旋转屈光度调节环。确保两眼视野一致。固定目镜位置。低倍镜观察先用低倍镜寻找目标。调节粗准焦螺旋。观察视野整体情况。选择感兴趣区域。高倍镜观察转换为高倍物镜。使用细准焦螺旋。避免物镜触碰载玻片。调整光圈大小。油镜使用滴加一滴浸油。缓慢转动物镜转盘。防止气泡产生。使用后清洁镜头。
血液细胞计数细胞类型计数方法稀释液计数区域正常参考值红细胞手工法/仪器法生理盐水中央25个小方格男:4.5-5.5×1012/L白细胞手工法/仪器法2%醋酸四角大方格4-10×10?/L血小板手工法/仪器法1%草酸铵中央25个小方格100-300×10?/L
血液涂片制备与染色血液涂片制备要点:角度30°。滴血量适中。动作轻快均匀。涂片厚度适中。Wright染色步骤:空气干燥。加缓冲液。轻轻吹气混匀。水洗干净。自然晾干。
血细胞形态学检查正常血细胞形态红细胞呈双凹圆盘状。中央淡染。大小一致。白细胞核形各异。血小板呈紫色颗粒。异常红细胞形态大小不等症。形态异常。镰刀形细胞。靶形红细胞。可见核红细胞。白细胞分类中性粒细胞:分叶核。嗜酸性粒细胞:橘红色颗粒。淋巴细胞:核大胞浆少。单核细胞:最大白细胞。
血液生化检验基础结果分析对照参考值判断。分析临床意义。考虑干扰因素。质量控制每日校准仪器。运行质控品。绘制质控图。操作流程样本预处理。仪器调试。试剂加入。数据读取。原理掌握了解反应原理。熟悉仪器构造。掌握方法特点。
血糖测定3.9-6.1正常空腹血糖范围(mmol/L)空腹8小时后测定7.8正常餐后2小时血糖(mmol/L)葡萄糖负荷后测定4.0-8.0糖化血红蛋白参考范围(%)反映近3个月血糖控制1-2%测定允许误差范围质量控制要求
血脂检测
肝功能检查转氨酶测定ALT、AST测定反映肝细胞损伤程度1胆红素测定总胆红素与直接胆红素区分肝胆疾病类型蛋白测定白蛋白与球蛋白比例反映肝脏合成功能结果分析综合多指标判断肝功能状态和疾病类型
肾功能检测尿素氮测定反映机体蛋白质代谢和肾脏排泄功能。正常值为2.9-8.2mmol/L。升高提示肾功能不全。肌酐检测稳定反映肾小球滤过功能。男性53-106μm
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