牛疱疹病毒4型TL01株的分离鉴定及遗传进化分析.pdfVIP

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南京农业大学学报２０２５ꎬ４８(３):６０４６１１ｈｔｔｐ://ｎａｕｘｂ.ｎｊａｕ.ｅｄｕ.ｃｎ

ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＤＯＩ:１０.７６８５/ｊｎａｕ.２０２４０２００５

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张心琴ꎬ戴鑫钧ꎬ姚火春.牛疱疹病毒４型ＴＬ０１株的分离鉴定及遗传进化分析[Ｊ].南京农业大学学报ꎬ２０２５ꎬ４８(３):６０４６１１.

ＺＨＡＮＧＸｉｎｑｉｎꎬＤＡＩＸｉｎｊｕｎꎬＹＡＯＨｕｏｃｈｕｎ.Ｉｓｏｌａｔｉｏｎꎬｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆａｂｏｖｉｎｅｈｅｒｐｅｓｖｉｒｕｓ４ｉｓｏｌａｔｅＴＬ０１[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇ

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ＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬ２０２５ꎬ４８(３):６０４６１１.

牛疱疹病毒４型ＴＬ０１株的分离鉴定及遗传进化分析

１ꎬ２１ꎬ２１ꎬ２∗

张心琴ꎬ戴鑫钧ꎬ姚火春

(１.南京农业大学动物医学院ꎬ江苏南京２１００９５ꎻ

２.南京农业大学世界动物卫生组织猪链球菌病参考实验室ꎬ江苏南京２１００９５)

摘要:[目的]本文旨在对一种与奶牛繁殖障碍疾病有关的国内新发病原牛疱疹病毒４型(ＢｏＨＶ￣４)进行检测、分离与鉴定ꎮ

[方法]采集我国东北地区某养牛场疑似发生ＢｏＨＶ￣４感染牛的生殖道拭子ꎬ将阳性样本接种ＨｅＬａ细胞分离病毒ꎬ通过特

异性ｑＰＣＲ、间接免疫荧光(ＩＦＡ)及电镜观察等方法对分离病毒进行鉴定ꎬ并测定病毒一步生长曲线ꎮ用ＰＣＲ扩增病毒ｇＢ

和ＴＫ基因并进行遗传进化分析ꎮ[结果]阳性样本接种细胞后盲传３代ꎬ能够产生圆缩、聚集等疱疹病毒典型细胞病变效

应(ＣＰＥ)ꎬ从ＩＦＡ结果观察到感染病毒的细胞中出现明显的特异性绿色荧光ꎬ电镜观察感染细胞可见直径１００~１５０ｎｍ的

６.３－１

病毒粒子ꎬ衣壳和囊膜结构清晰ꎬ将该毒株命名为ＴＬ０１ꎮ其生长曲线显示在感染后３６ｈ达到峰值(１０ＴＣＩＤｍＬ)ꎮ

５０

ＰＣＲ扩增病毒ｇＢ和ＴＫ基因并对其序列进行遗传进化分析ꎬ发现ＴＬ０１的ｇＢ基因与参考株ＤＮ５９９在同一分支ꎬ属于基因２

型ꎻＴＬ０１的ＴＫ基因与参考株Ｍｏｖａｒ３３/６３同属于基因１型ꎮ[结论]本研究成功分离出１株ＢｏＨＶ￣４毒株ꎬ为深入研究

ＢｏＨＶ￣４的生物学特性和流行病学提供参考ꎮ

关键词:牛疱疹病毒４型ꎻ病毒分离鉴定ꎻ遗传进化分析

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