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2025年细胞生物学实验室操作规范考核试题及答案解析

单位所属部门：________姓名：________考场号：________考生号：________

一、选择题

1.细胞生物学实验中，用于固定细胞的化学物质通常是（）

A.乙醇

B.甲醇

C.丙酮

D.以上都是

答案：D

解析：乙醇、甲醇和丙酮都是常用的细胞固定剂，它们能够使细胞蛋白质变性凝固，保持细胞形态和内部结构，为后续的染色和观察提供基础。在实际操作中，可以根据实验需求选择不同的固定剂或混合使用。

2.制作细胞涂片时，下列哪一步是错误的（）

A.细胞悬液应充分混匀

B.涂片时用力过猛会导致细胞重叠

C.涂片后应立即干燥

D.涂片应均匀分布

答案：C

解析：细胞涂片制作完成后，通常需要经过固定、染色等步骤，而不是立即干燥。立即干燥会导致细胞变形甚至死亡，影响观察结果。正确的操作应该是将涂片固定后，再进行染色和其他处理。

3.在使用相差显微镜观察活细胞时，下列哪一项是正确的（）

A.细胞需要经过染色

B.细胞需要经过固定

C.细胞不需要经过染色或固定

D.细胞需要经过特殊处理

答案：C

解析：相差显微镜利用相差板和聚光器产生的光程差，使不同折射率的细胞结构产生不同的光强差异，从而观察到活细胞的内部结构。因此，使用相差显微镜观察活细胞时，不需要对细胞进行染色或固定，以保持细胞的自然状态和生理活性。

4.细胞培养过程中，CO2培养箱的主要作用是（）

A.提供无菌环境

B.调节pH值

C.提供温度

D.促进细胞生长

答案：B

解析：细胞培养过程中，CO2培养箱的主要作用是通入一定浓度的CO2，通过CO2与水反应产生碳酸，从而调节培养液的pH值，使其维持在适宜细胞生长的范围内。一般来说，细胞培养常用的CO2浓度为5%。

5.制备电镜样品时，下列哪一步是错误的（）

A.样品需要经过固定

B.样品需要经过脱水

C.样品需要经过包埋

D.样品可以直接观察

答案：D

解析：制备电镜样品需要经过一系列复杂的过程，包括固定、脱水、包埋、切片、染色等步骤，以获得高分辨率的细胞结构图像。样品不能直接观察，因为电镜需要高真空环境，而生物样品在真空中会迅速失水变形。

6.流式细胞术主要用于（）

A.细胞计数

B.细胞分选

C.细胞表型分析

D.以上都是

答案：D

解析：流式细胞术是一种能够对单个细胞进行快速、多参数定量分析的技术，主要用于细胞计数、细胞分选和细胞表型分析等方面。通过激光照射细胞并检测散射光和荧光信号，可以获得细胞的大小、颗粒度、细胞周期、凋亡状态等多种信息。

7.在进行免疫荧光实验时，下列哪一步是错误的（）

A.细胞需要经过固定

B.细胞需要经过通透

C.直接使用二抗

D.需要使用封闭液

答案：C

解析：免疫荧光实验通常需要经过固定、通透、封闭、一抗孵育、二抗孵育、荧光染色等步骤。固定是为了固定细胞结构，通透是为了使抗体进入细胞内部，封闭是为了防止非特异性结合，一抗和二抗分别用于特异性结合和信号放大，荧光染色是为了观察结果。直接使用二抗是不正确的，因为二抗需要与一抗特异性结合，而一抗尚未加入。

8.细胞增殖实验中，常用的指标是（）

A.细胞数量

B.细胞活力

C.细胞形态

D.以上都是

答案：A

解析：细胞增殖实验主要用于检测细胞的生长和繁殖能力，常用的指标是细胞数量，例如MTT法、CCK8法等都是通过检测细胞代谢活性来反映细胞数量的变化。细胞活力和细胞形态也是重要的观察指标，但它们通常不是细胞增殖实验的主要指标。

9.在进行细胞融合实验时，下列哪一项是正确的（）

A.融合率越高越好

B.融合率越低越好

C.融合率应控制在一定范围内

D.融合率与实验目的无关

答案：C

解析：细胞融合实验通常是为了获得杂交细胞，例如杂交瘤细胞等，融合率是衡量实验成功与否的重要指标。融合率过高或过低都可能影响实验结果，因此应该将融合率控制在一定范围内，以获得最佳的实验效果。

10.细胞凋亡实验中，常用的检测方法是（）

A.TUNEL法

B.MTT法

C.流式细胞术

D.以上都是

答案：D

解析：细胞凋亡实验有多种检测方法，包括TUNEL法、流式细胞术、AnnexinVFITC/PI双染法等。TUNEL法检测DNA片段化，流式细胞术检测细胞凋亡相关蛋白表达和细胞膜通透性变化，AnnexinVFITC/PI双染法可以区分早期凋亡、晚期凋亡和坏死细胞。MTT法主要用于检测细胞活力，与细胞凋亡检测无关。因此，以上都是细胞凋亡实验中常用的检测方法。

11.细胞培养过程中，维持培养箱内湿度在90%以上的主要目的是（）

A.防止培养液蒸发

B.为细胞提供水分

C.模拟体内环境

D.有利于CO2溶解

答案