病毒的分子生物学.pptVIP

12.2.7腺病毒作为基因治疗的载体腺病毒用作基因治疗载体和疫苗研制有着广阔的前景。腺病毒基因组的E1区和E3区可以作为外源基因的插入区。E1区缺失的腺病毒可克隆约4.7kb的外源DNA，而E3区缺失的腺病毒可以克隆约8kb的外源DNA，一些特定的腺病毒株已被用于人类疫苗的研制。第30页，共56页，星期日，2025年，2月5日腺病毒作为基因治疗载体有着以下几方面的优点：(1)腺病毒基因组研究的比较清楚，便于进行遗传操作。(2)其感染一般不引起明显的症状，与宿主染色体整合的机率很低，作为基因治疗的载体比较安全。第31页，共56页，星期日，2025年，2月5日(3)可以感染不同类型细胞，易于进行体外培养，病毒感染细胞滴度高，可在细胞内有效复制。(4)腺病毒感染细胞后可以高水平的表达蛋白，在感染后期，宿主基因表达被关闭，易于高水平表达外源基因。第32页，共56页，星期日，2025年，2月5日12.3RNA病毒的分子生物学RNA病毒基因组均呈线状，有单双链之分，有单一分子，也有的基因组是分段的。RNA的二级结构对病毒基因表达调控有重要影响。第33页，共56页，星期日，2025年，2月5日下面介绍一种典型的RNA病毒，黄病毒科丙型肝炎病毒属的成员——丙型肝炎病毒(HCV)。第34页，共56页，星期日，2025年，2月5日12.3.1HCV的发现丙型肝炎病毒HCV(hepatitisCvirus)是应用分子生物学技术对病毒进行研究的成功实例。第35页，共56页，星期日，2025年，2月5日12.3.2HCV基因组的结构与功能HCV是有外膜的单正链RNA病毒，基因组长约l0000nt。HCV仅有一个几乎为全基因组长度的翻译可读框ORF，编码3010~3033个AA的多聚蛋白，经过蛋白酶加工，切割成结构蛋白和调节蛋白。许多黑猩猩和人类HCV毒株已被完全测序。第36页，共56页，星期日，2025年，2月5日12.3.3HCV基因组的复制第37页，共56页，星期日，2025年，2月5日12.4反转录病毒的分子生物学反转录病毒基因组是线形正链RNA,正链RNA没有mRNA活性，需要在自身的反转录酶的作用下，将正链RNA反转录成双链DNA，通过向宿主细胞基因组的整合，在宿主细胞RNA聚合酶的作用下转录出mRNA。第38页，共56页，星期日，2025年，2月5日人类免疫缺陷病毒(HIV)是最典型也是最重要的反转录病毒。以下简要介绍HIV的分子生物学。第39页，共56页，星期日，2025年，2月5日12.4.1艾滋病与HIV艾滋病是一种导致以全身免疫系统严重损害为特征的传染性疾病，人类免疫缺陷病毒(HIV)是其病原体，感染者终生携带病毒，目前缺乏有效的治疗手段。第40页，共56页，星期日，2025年，2月5日病毒的分子生物学第1页，共56页，星期日，2025年，2月5日12.1病毒分子生物学研究的内容病毒分子生物学是用现代分子生物学的新理论、新技术和新方法对病毒基因组的结构与功能，基因组的复制、表达和调控，病毒与宿主的相互作用关系等进行研究的一门学科。第2页，共56页，星期日，2025年，2月5日人类对病毒的研究成果在现代分子生物学的发展史上，做出了重大的贡献。许多分子生物学上的重大突破都是以病毒作为模式或研究材料而进行的。第3页，共56页，星期日，2025年，2月5日其研究成果除了揭示许多重要的分子生物学过程之外，对人类认识病毒感染、致病的分子本质，为病毒引起疾病的诊断、预防和治疗提供了理论基础，促进了基因工程疫苗和抗病毒药物的研制和发展。第4页，共56页，星期日，2025年，2月5日病毒分子生物学研究领域12.1.1病毒基因组的结构12.1.2病毒基因组的复制和表达调控12.1.3病毒对宿主细胞的影响12.1.4病毒与肿瘤发生12.1.5病毒的基因工程疫苗与病毒载体第5页，共56页，星期日，2025年，2月5日12.1.1病毒基因组的结构不同类型的病毒，其基因组有很大差异。在核酸类型上，有DNA病毒(如腺病毒)，有RNA病毒(如反转录病毒)，但对每一种病毒来说，它只能含有一种核酸。第6页，共56页，星期日，2025年，2月5日从核酸结构上看，有的是单链核酸，有的是双链核酸，有的是线状，有的是环状。一些单链RNA病毒的基因组还具有不同的极性，有的是正链RNA，有的是负链RNA。第7页，共56页，星期日，2025年，2月5日有的正链RNA病毒基因组5′端有帽子结构，也有的正链RNA