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再生医学ELISA检测技术员岗位考试试卷及答案

一、单项选择题（每题2分，共20分）

1.ELISA检测中，包被抗体的常用缓冲液是（）

A.磷酸盐缓冲液B.碳酸盐缓冲液C.Tris缓冲液D.醋酸盐缓冲液

2.ELISA实验中，终止液的主要成分是（）

A.硫酸B.盐酸C.氢氧化钠D.碳酸钠

3.进行ELISA检测时，酶标仪的常用检测波长是（）

A.450nmB.560nmC.630nmD.750nm

4.以下哪种物质不能作为ELISA检测的固相载体（）

A.聚苯乙烯B.聚氯乙烯C.玻璃D.聚丙烯

5.为保证ELISA检测结果的准确性，样本离心转速一般为（）

A.1000r/minB.2000r/minC.3000r/minD.4000r/min

6.ELISA试剂盒保存温度一般是（）

A.-20℃B.-80℃C.2-8℃D.室温

7.封闭剂的作用是（）

A.去除杂质B.防止非特异性结合C.增强酶活性D.终止反应

8.洗板的目的不包括（）

A.去除未结合物质B.降低本底C.使反应更充分D.减少非特异性干扰

9.若ELISA检测结果OD值过高，可能原因是（）

A.样本稀释倍数过高B.酶标抗体浓度过低C.孵育时间过长D.洗板次数过多

10.标准曲线绘制通常采用（）

A.线性回归B.对数回归C.指数回归D.多项式回归

二、多项选择题（每题2分，共20分）

1.ELISA检测的类型有（）

A.双抗体夹心法B.间接法C.竞争法D.捕获法

2.影响ELISA检测结果的因素有（）

A.样本质量B.试剂盒质量C.操作过程D.仪器设备

3.ELISA检测中常用的酶有（）

A.辣根过氧化物酶B.碱性磷酸酶C.葡萄糖氧化酶D.脲酶

4.洗板过程中，正确的操作是（）

A.确保洗液充满孔板B.浸泡适当时间C.甩干孔内液体D.避免交叉污染

5.样本处理过程中，需要注意（）

A.避免溶血B.防止反复冻融C.及时检测D.准确吸取体积

6.ELISA检测所需的仪器设备有（）

A.酶标仪B.洗板机C.移液器D.恒温孵育箱

7.封闭剂可以是（）

A.牛血清白蛋白B.脱脂奶粉C.明胶D.聚乙二醇

8.酶标抗体的保存要点包括（）

A.低温保存B.避免反复冻融C.加保护剂D.避光保存

9.标准品的要求有（）

A.纯度高B.稳定性好C.与样本有相似的免疫反应性D.容易获取

10.若ELISA检测结果出现异常，可能的解决方法有（）

A.重新检测样本B.检查试剂盒有效期C.校准仪器D.优化操作流程

三、判断题（每题2分，共20分）

1.ELISA检测只能用于检测蛋白质。（）

2.酶标仪在使用前不需要预热。（）

3.洗板次数越多，检测结果越准确。（）

4.样本离心后可以直接进行ELISA检测。（）

5.封闭时间过长不会影响检测结果。（）

6.ELISA试剂盒开封后可长期使用。（）

7.酶标抗体可以在室温下保存较长时间。（）

8.标准曲线绘制好后就可以一直使用。（）

9.检测过程中移液器吸头不需要更换。（）

10.孵育温度不准确会影响ELISA检测结果。（）

四、简答题（每题5分，共20分）

1.简述双抗体夹心法ELISA的基本原理。

答：将特异性抗体包被于固相载体，加入待检抗原，抗原与固相抗体结合；再加入酶标特异性抗体，它与已结合在固相上的抗原结合，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物；加入底物，酶催化底物显色，颜色深浅与抗原含量成正比。

2.ELISA检测中，如何避免非特异性结合？

答：使用合适的封闭剂封闭固相载体表面未结合位点；洗板要充分，去除未结合物质；控制反应条件如温度、时间等；选择质量好的试剂盒；样本处理要规范，避免杂质干扰。

3.简述样本处理的重要性及一般步骤。

答：重要性：样本质量直接影响检测结果准确性。一般步骤：采集样本，及时离心分离血清或血浆，避免溶血和反复冻融，离心后若不能及时检测需妥善保存，检测前要平衡至室温并充分混匀。

4.当ELISA检测结果出现假阳性时，可能的原因有哪些？

答：可能原因有：非特异性结合，如封闭不充分、洗板不彻底；样本中存在干扰物质，如类风湿因子等；试剂盒质量问题，如酶标抗体交叉反应；操作不当，如加样错误、孵育条件不合适等。

五、讨论题（每题5分，共20分）

1.讨论ELISA检测与其他检测方法相比，在再生医学领域的优势与局限性。

答：优势在于灵敏度高，能检测低浓度物质；特异性较强，可准确检测目标分子；操作相对简便，适合批量检测，在再生医学中可用于检测细胞因子等。局限性在于对样本要求高，易受干扰；检测时间较长；某些试剂盒价格较高；只能检测已知物质，对未知物质检测受限。

2.在ELISA检测过程中，如何保证实验数据的可靠性和重复性？

答：要使用合格试剂盒并按要求保存；规范样本采集与处理，保证样本质量均一；严格遵守操作规程，准确加样、控制