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第二讲微生物的培养与应用
o理考点•提素能O
考点一培养基及微生物的纯化培养技术
自.学:区
必备知识
[基础理]
1.培养基
(1)概念:人们按照微生物对萱养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质。
(2)种类
①按物理状态可分为液体培养基和固体培养基。
②按功能可分为选择培养基和鉴别培养基。
(3)成分:各种培养基一般都含有水、碳避、氮源和无机盐,此外还要满足微生物生长
对辿、特殊营养物质以及氧气的要求。
2.无菌技术
(1)关键:防止外来杂菌的入侵。
(2)常用方法
项目理化因素的作用强度能否消灭芽胞和抱子常用方法
煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学
消毒较为温和不能
药剂消毒法
灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽
灭菌强烈能
灭菌
3.大肠杆菌的纯化培养
(1)制备固体培养基的步骤
(2)纯化大肠杆菌
①平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面连鎏划绩的操作,将聚集的菌种逐
步稀释分散到培养基的表面。
②稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的梯度箍狸,然后将不同稀释度的菌液分别涂
布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
(3)菌种的保存
①对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的方法。
②对于需要长期保存的菌种,可以采用甘油萱藏的方法。
基[础小题]
1.判断正误
(1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机,有时还需要加入一些特殊的物质3)
(2)无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽
灭菌法进行灭菌(X)
(3)配制培养基时应先灭菌再调pH(X)
(4)平板划线法中每一次划线后要将接种环灼烧(J)
(5)倒平板时,应将打开的皿盖放到一边,以免培养基溅到皿盖上(X)
(6)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时,只要稀释度足够高,就能在培养基表面形成单
个菌落(J)
2.教材拾遗
(1)倒平板时为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?
提示:通过灼烧灭菌,防止瓶口的微生物污染培养基。
(2)平板冷凝后,为什么要将平板倒置?
提示:可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染,冲散菌落。
(3)微生物的接种技术还包括斜面接种、穿刺接种等方法。虽然这些技术的操作方法各
不相同,但是,其核心都是要防止杂菌的污染,保证培养物的纯度。
3.热图导析
(1)下图是倒平板的操作,请据图填空
①请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程:丙f乙f甲一丁。
②乙中的灭菌方法是灼烧灭菌。
③丁中的操作需要等待平板冷却凝固后才能进行。
⑵连线无菌技术的常用方法及适用对象
类型方法对象
a.灼烧灭曲I.接种针(环)
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