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免疫学诊疗操作细则

一、概述

免疫学诊疗是现代医学的重要组成部分，通过检测人体免疫系统的各项指标，辅助诊断疾病、评估病情和监测治疗效果。本细则旨在规范免疫学诊疗操作流程，确保检测结果的准确性和可靠性，提高诊疗效率。操作流程涵盖样本采集、处理、检测、结果解读及报告等关键环节。

二、样本采集与处理

（一）样本采集要求

1.采集前准备：

(1)向受检者说明采集目的和注意事项；

(2)检查采集工具是否清洁、无菌；

(3)确认受检者处于空腹或按要求准备状态（如特定检测需禁食）。

2.常用样本类型及采集方法：

(1)全血样本：采用静脉穿刺法，采血量5-10ml，使用肝素抗凝管；

(2)血清样本：采集后立即离心（3000rpm，5分钟），分离血清置于EP管保存；

(3)体液样本：如脑脊液、胸水等，使用无菌注射器抽取，避免污染。

3.样本标识：

(1)标注受检者姓名、ID、采集时间；

(2)使用条形码或RFID标签减少错误。

（二）样本处理规范

1.全血样本处理：

(1)立即混匀抗凝管，避免血细胞聚集；

(2)4℃保存，24小时内完成检测。

2.血清样本处理：

(1)离心后取上清，避免溶血；

(2)-20℃冻存，避免反复冻融。

3.其他样本处理：

(1)脑脊液样本需立即检测，避免细胞沉淀；

(2)泌尿系统样本需在2小时内完成培养或生化检测。

三、检测方法与流程

（一）常用检测技术

1.酶联免疫吸附试验（ELISA）：

(1)试剂准备：检查酶标板、抗体、底物是否在有效期内；

(2)加样顺序：依次加入标准品、样本、酶标抗体；

(3)结果判读：使用酶标仪测定吸光度值，通过标准曲线计算浓度。

2.流式细胞术：

(1)设定门区：根据细胞特征划分淋巴细胞、粒细胞等亚群；

(2)统计指标：CD4+/CD8+比例、细胞因子分泌量等。

3.免疫印迹法：

(1)蛋白电泳分离；

(2)转膜后杂交，化学发光显色。

（二）操作步骤（以ELISA为例）

1.试剂与样本准备：

(1)检测前用37℃水浴复溶试剂；

(2)样本用移液器精确稀释至标准曲线范围。

2.加样与孵育：

(1)依次加入标准品、样本、酶标抗体；

(2)37℃孵育60分钟，洗板3次（3000rpm，30秒/次）。

3.显色与检测：

(1)加入TMB底物，避光反应30分钟；

(2)用酶标仪读取450nm波长吸光度值。

四、结果解读与报告

（一）结果判读标准

1.定量检测：根据标准曲线计算样本浓度，与参考范围对比；

(1)正常值范围（示例）：CD4+细胞计数300-1000个/μl，IgG水平7-16g/L。

2.半定量检测：通过灰度值评估抗体强弱；

(1)分级标准：阴性、弱阳性、阳性、强阳性。

（二）报告规范

1.报告内容：受检者信息、检测项目、结果数值、参考范围；

2.异常结果提示：标注显著偏离参考值的指标，并建议复查或进一步检测。

五、质量控制与安全

（一）质量控制措施

1.日常质控：每日使用质控品，确保CV（变异系数）5%；

2.定期校准：每季度校准仪器，记录校准参数。

（二）生物安全要求

1.操作人员需佩戴手套、口罩，避免样本交叉污染；

2.化学废弃物按规范处理，废弃样本高温高压灭菌。

**一、概述**

免疫学诊疗是现代医学的重要组成部分，通过检测人体免疫系统的各项指标，辅助诊断疾病、评估病情和监测治疗效果。本细则旨在规范免疫学诊疗操作流程，确保检测结果的准确性和可靠性，提高诊疗效率。操作流程涵盖样本采集、处理、检测、结果解读及报告等关键环节。熟悉并严格执行本细则，有助于减少操作误差，保障受检者安全和检测质量。

**二、样本采集与处理**

（一）样本采集要求

1.采集前准备：

(1)**核对受检者信息**：确认身份标识（如姓名、出生日期、ID号），确保与样本管标签一致，防止混淆。

(2)**解释告知**：向受检者或其家属说明采集目的、流程、注意事项及可能的不适感，获取知情同意。提醒受检者按要求准备（例如，某些检测需空腹、停用特定药物等）。

(3)**环境与工具检查**：确保采集环境清洁、整洁，符合生物安全要求。检查所有采集工具（注射器、针头、采血管、试管架等）是否在有效期内、包装是否完好、无破损，并处于无菌状态。采血管应符合相应检测要求（如含肝素、EDTA、柠檬酸钠等抗凝剂或促凝剂）。

(4)**手卫生**：操作者必须进行手卫生，穿戴合规的个人防护用品（手套、口罩、帽子）。

2.常用样本类型及采集方法：

(1)**全血样本**：

-**采集方法**：通常采用静脉穿刺法。选择合适部位（如肘正中静脉），消毒皮肤（通常使用70-75%乙醇棉签，待干燥），按标准操作规程穿刺采血。采血量根据检测项