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细胞治疗支原体检测员岗位考试试卷及答案

单项选择题（每题2分，共10题）

1.支原体直径约为（）

A.0.1-0.3μmB.0.5-1μmC.1-2μmD.2-5μm

2.检测支原体常用的方法不包括（）

A.培养法B.PCR法C.免疫荧光法D.比色法

3.支原体生长最适宜的pH是（）

A.6.0-6.5B.7.0-7.5C.7.5-8.0D.8.0-8.5

4.细胞培养中支原体污染后，细胞会出现（）

A.生长加快B.贴壁更牢C.形态改变D.无明显变化

5.以下哪种培养基可用于支原体培养（）

A.牛肉膏蛋白胨培养基B.伊红美蓝培养基C.SP4培养基D.LB培养基

6.进行支原体PCR检测时，引物设计依据是（）

A.支原体细胞膜蛋白B.支原体核糖体RNA基因C.支原体荚膜多糖D.支原体毒素基因

7.能抑制支原体生长的抗生素是（）

A.青霉素B.链霉素C.庆大霉素D.四环素

8.支原体的检测周期一般是（）

A.1-2天B.3-5天C.5-7天D.7-10天

9.支原体检测样本采集一般不采用（）

A.细胞培养液B.细胞裂解液C.血清D.细胞培养基干粉

10.免疫荧光法检测支原体利用的是（）

A.抗原抗体特异性结合B.核酸互补配对C.酶底物反应D.化学显色

多项选择题（每题2分，共10题）

1.支原体的特点包括（）

A.无细胞壁B.能在无生命培养基上生长C.对青霉素敏感D.呈多形性

2.细胞培养中支原体污染的来源可能有（）

A.实验人员操作不当B.血清污染C.培养基灭菌不彻底D.培养箱环境

3.以下属于支原体检测方法的有（）

A.荧光定量PCRB.电镜观察C.酶联免疫吸附试验D.相差显微镜观察

4.影响支原体培养结果的因素有（）

A.培养温度B.培养基成分C.气体环境D.接种量

5.进行支原体PCR检测时，需要注意（）

A.引物特异性B.模板纯度C.反应体系洁净D.扩增循环数

6.免疫荧光法检测支原体的优点有（）

A.灵敏度高B.特异性强C.可直接观察D.操作简单

7.支原体污染对细胞的影响包括（）

A.改变细胞代谢B.影响细胞基因表达C.导致细胞死亡D.促进细胞分化

8.常用的支原体去除方法有（）

A.抗生素处理B.过滤法C.热处理D.离心法

9.检测支原体时，样本保存需要注意（）

A.低温保存B.避免反复冻融C.加入防腐剂D.尽快检测

10.支原体检测相关的标准有（）

A.中国药典标准B.美国FDA标准C.企业内部标准D.行业协会标准

判断题（每题2分，共10题）

1.支原体是最小的原核细胞型微生物。（）

2.所有细胞培养过程都必须检测支原体。（）

3.支原体培养时不需要添加血清。（）

4.PCR检测支原体结果阴性就说明没有污染。（）

5.免疫荧光法可以区分不同种类的支原体。（）

6.支原体污染的细胞可以继续用于实验。（）

7.支原体在固体培养基上形成“油煎蛋”样菌落。（）

8.检测支原体的样本可以常温保存较长时间。（）

9.抗生素可以完全去除细胞中的支原体。（）

10.支原体检测方法只有一种。（）

简答题（每题5分，共4题）

1.简述支原体污染对细胞治疗的危害。

2.列举两种常用的支原体检测方法及原理。

3.进行支原体培养时，对培养条件有哪些要求？

4.细胞培养中如何预防支原体污染？

讨论题（每题5分，共4题）

1.讨论在细胞治疗过程中，定期进行支原体检测的重要性。

2.当支原体检测结果出现假阳性或假阴性时，应该如何处理？

3.对比不同支原体检测方法的优缺点，在实际工作中如何选择合适的方法？

4.谈谈如何提高支原体检测的准确性和可靠性。

答案

单项选择题

1.A

2.D

3.B

4.C

5.C

6.B

7.D

8.C

9.D

10.A

多项选择题

1.ABD

2.ABCD

3.ABCD

4.ABCD

5.ABCD

6.ABC

7.ABC

8.AB

9.ABD

10.ABCD

判断题

1.√

2.√

3.×

4.×

5.×

6.×

7.√

8.×

9.×

10.×

简答题

1.危害：改变细胞代谢、影响基因表达，导致细胞生长异常甚至死亡，影响细胞治疗效果和安全性。

2.培养法：利用支原体能在特定培养基生长的特性；PCR法：依据核酸互补配对，扩增支原体特定基因片段。

3.要求：适宜温度（37℃左右）、合适pH（7.0-7.5）、含血清等营养成分的培养基，以及5%CO?气体环境。

4.预防措施：规范人员操作，确保培养基、血清等无菌，定期清洁培养箱等环境。

讨论题

1.定期检测可及时发现支原体污染，避免污染扩散，保障细胞质量，确保细胞治疗的有效性和安全性。

2.假阳性时，重新检测样本，排查实验误差；假阴性时，换用其他检测方法，或扩大样本量检测。

3.培养法准确但耗时，PCR法快速但易污染等。根据检测目的、时间、成本等因素选择。

4.严格规范