细胞分子生物学研究方法.pptVIP

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miRNAandRNAiregulation;重点掌握:;含有30亿对碱基的人类基因组仅含有2-3万个蛋白质基因,是果蝇的两倍,啤酒酵母的4倍。显而易见,生物的复杂性不由编码蛋白质的数目决定。

人类基因组的蛋白质编码区的总和占总基因组长度为1-2%,那么其他98%的基因组有什么功能呢?当然,在这98%的非蛋白质编码基因组序列里,约24%为插入编码序列的内含子序列;人类基因平均每个基因有7个内含子。;人类基因组绝大部分都被转录成RNA,细胞内非编码RNA的数量是编码RNA的上百倍。这促使许多科学家认为生物体复杂性被隐藏在它们所输出的非编码RNA内,而非编码序列内。

表观遗传学是研究基因的核苷酸序列不发生改变的情况下,基因表达了可遗传的变化的一门遗传学分支学科。

表观遗传的现象已知的有DNA甲基化(DNAmethylation),基因组印记,miRNA等。

;;ThediscoveryofmiRNAs;ThefirstdiscoeredmiRNA:lin-4;BreakthroughwithBlastNofthesecondmiRNA(stRNA)let-7;microRNAshadbeenneglectedforsomanyyearsbecauseoftheirsmallsize.;ThenumberoftheidentifiedmiRNAsisgrowingrapidlyinrecentyears.Over5000miRNAshavebeenfound(ThemiRBaseSequenceDatabase).ThesemiRNAsarefromprimates,rodents,birds,fish,worms,flies,plantsandviruses.

;miRNAsinhuman:

Thereareabout500miRNAsfromhumanhavebeenfoundandannotated.Theyarenamedashsa-miRx.;Topic1:miRNAbiogenesisandregulation;(一).MicroRNA(miRNA)itsprocessing;miRNAprocessing;ThemiRNAgenesandStructureofpri-miRNAs;Atypicalmetazoanpri-miRNAconsistsofastemofapproximately33bp,withaterminalloopandflankingsegments.

Theterminalloopisunessential,whereastheflankingssRNAsegmentsarecriticalforprocessing.

Thecleavagesiteisdeterminedmainlybythedistance(approximately11bp)fromthestem-ssRNAjunction.;Hanetal.,Cell125,887–901,June2,2006;;;(二).MicroRNA(miRNA)targetsandregulation.;;;(三)MicroRNA在发育中的调控作用,及其他作用;VictorR.Ambros;lin-4andlet-7miRNAscontrolthedevelopmentaltimeofC.elegans.;Expressionoflin-4allowsC.eleganstoproceedtothelatedevelopmentalstage;2.miRNAsinvertebratedevelopment:TherearealotunknownbecausethethelackofefficientmethodstouncoverthetargetsofmiRNAs.;Figure2.ExpressionofmiR-124aandmiR-1inZebrafish,Medaka,Mouse,andFly.

miR-124aisrestrictedlyexpressedinthebrainandthespinalcordinfishandmouseortotheve

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