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载质粒电纺纤维膜：血管组织工程支架的创新与探索

一、引言

1.1研究背景与意义

血管疾病是全球范围内威胁人类健康的重要疾病之一，具有高发病率、高致残率和高死亡率的特点。根据世界卫生组织的数据，心血管疾病每年导致全球约1790万人死亡，占全球死亡人数的31%。在中国，心血管疾病患者人数已超过3.3亿，且呈逐年上升趋势。血管疾病的治疗方法主要包括药物治疗、介入治疗和手术治疗等，但这些方法都存在一定的局限性。例如，药物治疗只能缓解症状，无法根治疾病；介入治疗和手术治疗则需要使用血管移植物，但目前临床上常用的血管移植物，如自体血管、异体血管和人造血管，都存在各自的问题。自体血管来源有限，且获取过程会对患者造成额外的创伤；异体血管存在免疫排斥反应的风险；人造血管在小口径血管移植中效果不佳，容易出现血栓形成、内膜增生等问题，导致血管狭窄或闭塞。

组织工程作为一门新兴的交叉学科，为血管疾病的治疗提供了新的思路和方法。组织工程血管是利用组织工程技术构建的具有生物活性的血管替代物，其基本原理是将种子细胞接种到生物可降解的支架材料上，通过细胞的增殖和分化，形成具有正常血管结构和功能的组织。组织工程血管具有良好的生物相容性、可降解性和生物活性，能够避免传统血管移植物的诸多问题，具有广阔的应用前景。

电纺纤维膜由于其独特的纳米级纤维结构、高比表面积和良好的孔隙率，能够模拟细胞外基质的结构和功能，为细胞的黏附、增殖和分化提供良好的微环境，因此在组织工程领域得到了广泛的应用。载质粒电纺纤维膜是将编码特定生物活性分子的质粒DNA负载到电纺纤维膜中，通过质粒DNA的持续释放，实现对细胞行为和组织再生的调控。这种新型的电纺纤维膜不仅具有电纺纤维膜的优点，还能够发挥基因治疗的作用，为血管组织工程提供了一种更加有效的策略。

本研究旨在制备载质粒电纺纤维膜，并将其作为血管组织工程支架，研究其在血管再生中的应用效果。通过对载质粒电纺纤维膜的制备工艺、结构性能、体外释放行为、细胞相容性和体内血管再生能力等方面的研究，为组织工程血管的研发提供理论依据和技术支持，有望为血管疾病的治疗带来新的突破。

1.2国内外研究现状

在国外，载质粒电纺纤维膜作为血管组织工程支架的研究已经取得了一定的进展。例如，美国北卡罗来纳州立大学的研究团队通过乳液电纺技术制备了携载血管内皮生长因子（VEGF）编码质粒的核壳纤维，发现该纤维能够持续释放质粒DNA，促进内皮细胞的增殖和血管生成。韩国延世大学的研究人员则制备了载有碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）编码质粒的电纺纤维膜，在动物实验中证明了其能够有效促进血管再生。

国内的相关研究也在不断推进。复旦大学的科研人员制备了同时携载VEGF和bFGF编码质粒的电纺纤维膜，研究了其对血管平滑肌细胞和内皮细胞的生物学效应，结果表明该纤维膜能够协同促进两种细胞的增殖和分化，有利于血管组织的构建。上海交通大学的研究团队则通过优化电纺工艺，制备出了具有良好力学性能和细胞相容性的载质粒电纺纤维膜，并在体内实验中验证了其促进血管再生的能力。

然而，目前载质粒电纺纤维膜在血管组织工程中的应用仍面临一些挑战。例如，如何提高质粒DNA的负载效率和稳定性，如何实现质粒DNA的精准释放，以及如何进一步优化纤维膜的结构和性能以满足血管组织工程的需求等，都是亟待解决的问题。

1.3研究内容与方法

本研究的具体内容包括以下几个方面：首先，通过乳液电纺技术制备携载血管生成因子编码质粒的电纺纤维膜，优化制备工艺，提高质粒DNA的负载效率和稳定性；其次，对载质粒电纺纤维膜的结构、形貌、力学性能和降解性能等进行表征，研究其基本性能；然后，通过体外释放实验，探究质粒DNA从纤维膜中的释放规律；接着，将人脐静脉内皮细胞（HUVEC）接种于载质粒电纺纤维膜上，考察细胞的黏附、增殖、转染效率及细胞外基质分泌等生物学行为，评价纤维膜的细胞相容性；最后，将载质粒电纺纤维膜植入大鼠皮下，通过组织学观察和免疫组化分析，评价其促进血管再生的能力。

在研究方法上，采用扫描电子显微镜（SEM）观察纤维膜的形貌；利用傅里叶变换红外光谱仪（FTIR）分析纤维膜的化学结构；通过万能材料试验机测试纤维膜的力学性能；使用凝胶渗透色谱仪（GPC）测定纤维膜的降解性能；运用荧光定量PCR和Westernblot等技术检测细胞的转染效率和目标蛋白的表达；通过组织切片和免疫组化染色观察体内血管再生情况。

1.4创新点

本研究的创新点主要体现在以下几个方面：在材料选择上，选用了具有良好生物相容性和可降解性的聚乳酸-聚乙二醇共聚物（PELA）作为电纺纤维膜的基质材料，并结合乳液电纺技术，实现了对质粒DNA的有效包裹和稳定负载；在制备工艺上，通过优化乳液电纺参数，如