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华北农学报２０２５ꎬ４０(３):２２５—２３３
牦牛ＭＡＰ３Ｋ７基因克隆
及其与皮下前体脂肪细胞分化关系分析
蓝湘一ꎬ何洋洋ꎬ张明ꎬ黄慈ꎬ王海波ꎬ王会ꎬ柴志欣ꎬ钟金城
(西南民族大学青藏高原动物遗传资源保护与利用四川省重点实验室ꎬ
青藏高原动物遗传资源保护与利用教育部重点实验室ꎬ四川成都６１００４１)
摘要:ＭＡＰ３Ｋ７是ＭＡＰ３Ｋ家族中的一员ꎬ在脂肪分化、炎症和肿瘤发生过程中发挥着重要作用ꎬ但其与牦牛脂肪分化的
关系未见报道ꎬ并且其基因序列未知ꎬ制约了相关功能研究ꎮ为了获得牦牛ＭＡＰ３Ｋ７基因编码区(ＣＤＳ)保守区域序列ꎬ明
确其表达特征ꎬ了解其在牦牛不同组织中的表达水平及其与牦牛皮下前体脂肪细胞分化的相关性ꎬ利用ＲＴ￣ＰＣＲ技术ꎬ克隆
牦牛ＭＡＰ３Ｋ７基因并利用生物信息学方法分析生物学特性ꎻ利用实时荧光定量ＰＣＲ(ｑＰＣＲ)技术检测ＭＡＰ３Ｋ７在牦牛心、
肝、脾等１０个组织中的表达情况ꎬ与不同分化阶段牦牛皮下脂肪细胞中ＭＡＰ３Ｋ７基因和脂分化相关基因的表达情况ꎬ同时结
合油红Ｏ染色ꎬ明确ＭＡＰ３Ｋ７基因对牦牛皮下前体脂肪细胞分化的影响ꎮ结果表明:克隆所得牦牛ＭＡＰ３Ｋ７基因ＣＤＳ区长
度为１７４０ｂｐꎬ编码５７９个氨基酸ꎬ与野牦牛ＭＡＰ３Ｋ７预测序列ＣＤＳ区比对发现第９６７位ＡＧꎬ导致第３２３位氨基酸Ｔｈｒ
Ａｌａ的突变ꎮ理化性质分析发现ꎬ该蛋白为整体带负电的亲水酸性蛋白ꎬ具有１１２个氨基酸磷酸化位点ꎬ其氨基酸组成中ꎬ占
比最高的是丝氨酸ꎻ二级结构预测显示ꎬ其无规卷曲含量最高ꎬ可能与ＴＡＢ３等蛋白质间存在相互作用关系ꎮ核苷酸同源性
比对与进化树结果表明ꎬ牦牛ＭＡＰ３Ｋ７在反刍动物间具有较高的保守性ꎬ与野牦牛同源性最高且进化关系最近ꎮ组织定量
检测发现ꎬＭＡＰ３Ｋ７在牦牛皮下脂肪和内脏脂肪中的表达量相对较低ꎬ在牦牛皮下前体脂肪细胞诱导分化过程中ꎬＭＡＰ３Ｋ７
表达量随着成熟脂肪细胞的增多先上调ꎬ至分化到一定程度后下调ꎮ综上ꎬＭＡＰ３Ｋ７基因在牦牛皮下前体脂肪细胞分化前期
高表达以促进分化ꎬ但当分化到一定程度时ꎬ表达下调抑制进一步分化ꎮ
关键词:牦牛ꎻＭＡＰ３Ｋ７ꎻ基因表达ꎻ皮下脂肪ꎻ脂肪分化
———
中图分类号:Ｓ８２３.８５文献标识码:Ａ文章编号:１０００７０９１(２０２５)０３０２２５０９
ｄｏｉ:１０.７６６８/ｈｂｎｘｂ
ＣｌｏｎｉｎｇｏｆＹａｋＭＡＰ３Ｋ７ＧｅｎｅａｎｄＩｔｓＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｗｉｔｈ
ｔｈｅＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＳｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓＰｒｅａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ
ＬＡＮＸｉａｎｇｙｉꎬＨＥＹａｎｇｙａｎｇꎬＺＨＡＮＧＭｉｎｇꎬＨＵＡＮＧＣｉꎬＷＡＮＧＨａｉｂｏꎬ
ＷＡＮＧＨｕｉꎬＣＨＡＩＺｈｉｘｉｎꎬＺＨＯＮＧＪｉｎｃｈｅｎｇ
(Ｑｉｎｇｈａｉ￣ＴｉｂｅｔａｎＰｌａｔｅａｕＡｎｉｍａｌＧｅｎｅｔｉｃＲｅｓｏｕｒｃｅＲｅｓｅｒｖａｔｉｏｎａｎｄＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆ
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Ａｂｓｔｒａｃｔ:ＭＡＰ３Ｋ７ｉｓａｍｅｍｂｅｒｏｆｔｈｅＭＡＰ３Ｋｆａｍｉｌｙａｎｄｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎｆａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎꎬｉｎ￣
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