原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
脑部细胞基因表达谱分析技术
目录
文档概括．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．4
1.1研究背景与意义．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．5
1.2脑部细胞组学概述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．6
1.3基因表达谱分析技术简介．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．8
脑部细胞采集与制备技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．11
2.1样本获取方法学．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．12
2.1.1尸脑样本采集规范．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18
2.1.2脑组织活检技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．20
2.2细胞分离与鉴定方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．21
2.2.1机械/物理法分离技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23
2.2.2密度梯度离心法应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．26
2.2.3细胞表面标记介导纯化．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．29
2.2.4单细胞分离新进展．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．30
基因转录组捕获策略．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．32
3.1RNA提取与质量控制．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．35
3.1.1总RNA提取方案比较．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．36
3.1.2RNA完整性与纯度评估．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．39
3.2基因组范围．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．42
3.2.1全基因组oligo．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．44
3.2.2关键步骤流程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．46
基因表达谱测序技术．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．51
4.1高通量测序方法学．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．54
4.1.1基于捕获的测序方案．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．56
4.1.2直接RNA测序技术(如RNASeq)．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．57
4.1.3Poolbygene技术途径．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．62
4.2测序数据质控与准备．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．64
4.2.1原始数据质量评估标准．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．67
4.2.2显著性降低与适配体去除．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．70
4.2.3去宿主污染处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．72
基因表达数据分析流程．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．73
5.1数据序列比对与格式转换．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．74
5.2表达矩阵构建与归一化处理．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．79
5.2.1基本计数矩阵生成．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．80
5.2.2归一化方法选择与应用．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．81
5.3差异表达分析方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．83
5.3.1统计显著性检验模型．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．86
5.3.2多层次筛选标准．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．88
5.4微阵列标准化方法．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．
文档评论（0）